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膠質(zhì)母細胞瘤細胞;A172

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產(chǎn)品型號

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廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時間:2021-04-07 19:58:36瀏覽次數(shù):821次

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U251膠質(zhì)瘤細胞
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公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

膠質(zhì)母細胞瘤細胞;A172

貼壁生長

EY-X63558

細胞名稱  膠質(zhì)母細胞瘤細胞;A172
形態(tài)特性:

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 在半固體培養(yǎng)基中形成。在免疫抑制小鼠中不成瘤。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%

傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

傳代情況: P311

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO株;7WML6.0拉丁屬名: Aspergillus niger2-氨基-5-氟吡啶Human SIX4 ELISA Kit
人APP基因轉(zhuǎn)染CHO株;7WD10拉丁屬名: perfringens Type D2-氨基-5-氟吡啶Human SIX5 ELISA Kit
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染株;7WCY1.0拉丁屬名: Cyathus striatus2-氨基-5-氟吡啶Human SKAP2 ELISA Kit
倉鼠卵巢;Lec1注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用三亞苯Human SKIV2L2 ELISA Kit
中國倉鼠肺;R 1610 [R1610]拉丁屬名: Arthrobacter psychrochitiniphilus三亞苯Human SKIL ELISA Kit
二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢;CHO/dhFr-拉丁屬名: Halorubrum sod952ense三亞苯Human SKIV2L ELISA Kit
敘利亞倉鼠系;Syrian Hamster AV12拉丁屬名: Candida sorboxylosa烯基二硫Human SIN3A ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。籆HO 1beta9,12.5 Clone 36拉丁屬名: Geobacter anodireducens烯基基二硫Human SKP1 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-HCV-NS5A拉丁屬名: Piricularia oryza烯基基二硫Human MUC12(Mucin-12) ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B拉丁屬名: Gibberella sp.4-氨基-3-氯苯Human SIP1 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A拉丁屬名: Devosia  riboflavina4-氨基-3-氯苯Human SIGLEC6 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。?;CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA拉丁屬名: Rhizopus arrhizus var. arrhizus2-氨基辛酸Human SIKE1 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。籆HO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用5-芐硫基四氮唑Human SHOX ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。?;CHO Hu 164 SCF 17拉丁屬名: Aspergillus  flavus5-芐硫基四氮唑Human SIM2 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。籆HO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)拉丁屬名: Streptomyces carpinensis叔丁氧羰基-L-Human SHMT2 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢(亞系克?。籆HO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr拉丁屬名: Candida haemulonii叔丁氧羰基-L-Human SHROOM1 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢系;CHO-TGF-

膠質(zhì)母細胞瘤細胞;A172人輪狀病(RV)IgMELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人腺病IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人腺病IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人流感病抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

人利什曼原蟲抗體(LeishimariaAb)ELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

EB病IgG(EBvIgG)ELISA試劑盒sICAM-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

EB病IgA(EBvIgA)ELISA試劑盒sIgAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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