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Elisa實驗類型選擇

時間：2016/8/29閱讀：1141

Elisa實驗類型選擇
酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技術(shù)從1970年代發(fā)展至今已近半個世紀，是一項實驗室zui基本的免疫檢測技術(shù)，被廣泛的應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗。那么面對市面上數(shù)以千計的試劑盒，數(shù)百家供應(yīng)商，對于剛進入實驗室的新手或者準(zhǔn)備開展ELISA實驗的人員，又該如何選擇且質(zhì)量又可靠的ELISA試劑盒呢？
1. 首先選定ELISA類型
ELISA技術(shù)可用于測定抗原，也可用于測定抗體。牛ELISA檢測試劑盒 ELISA方法中有三個必要的試劑：(1) 固相的抗原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；(2) 酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；(3) 酶反應(yīng)的底物。
一般可將ELISA分為以下幾種類型，實驗君首先需要根據(jù)自己的待檢物來確定試劑盒類型。
1) 雙抗體夾心法：針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原如血漿中的細胞因子，不適用于測定半抗原及小分子單價抗原。同理，也有雙抗原夾心法測抗體。
2) 直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一抗，即可測定抗原總量。此法操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
3) 間接法：間接法是檢測抗體常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗抗體）來檢測與固相抗原結(jié)合的待檢抗體。
4) 競爭法：小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法模式。當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體。

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