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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒甲狀腺冰凍切片操作方法

時(shí)間：2017/1/10閱讀：1289

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?甲狀腺冰凍切片操作方法

1. 主要試劑與儀器

0.5%氨水返藍(lán)液抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?、Gill改良蘇木精染液、0.5%～1%鹽酸乙醇分化液、1%醇溶性伊紅染液、甲醇醋酸混合固定液（甲醇50ml、冰醋酸2.5ml）、各梯度乙醇溶液、二甲苯及中性樹膠均

2.操作方法

冷凍機(jī)溫度為-15℃～-18℃。將新鮮活體組織塊切成1.5cm×1.5cm×0.3cm大小，速凍，切片厚度為5μm。粗修組織塊，然后細(xì)修切面，再用戴手套手的大拇指或大魚際肌在切面上溫暖2～3s，動(dòng)作稍慢而勻速。抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?切片制成后立即放入甲醇醋酸混合固定液固定0.5～1min后水洗，Gill改良蘇木精染胞核1～3min后水洗，0.5%～1%鹽酸乙醇分化液分化1～2次后水洗，0.5%氨水返藍(lán)2s后水洗，1%醇溶性伊紅染胞質(zhì)10s，逐級(jí)梯度乙醇快速脫水，中性樹膠封固[1-2]。

3.結(jié)果

3.1 取材浸水對(duì)組織HE染色效果的影響

組織浸水后鏡下出現(xiàn)冰晶及類似氣泡樣的“黑水珠”，按壓不會(huì)消失；未浸水組織結(jié)構(gòu)完整，未見上述現(xiàn)象。

3.2 冷凍溫度對(duì)組織

冷凍溫度過低時(shí)，鏡下出現(xiàn)甲狀腺膠質(zhì)染色不均勻，甚至出現(xiàn)多量大小不一的空泡；溫度適宜時(shí)，組織結(jié)構(gòu)清晰完整、細(xì)胞無明顯膨脹、極少有冰晶形成。

3.3 復(fù)溫對(duì)組織

HE染色效果未復(fù)溫時(shí)，鏡下顯示濾泡與濾泡之間出現(xiàn)收縮裂隙；復(fù)溫后無收縮裂隙情況出現(xiàn)。

3.4 固定液對(duì)組織

固定液中未加冰醋酸時(shí)，鏡下顯示膠質(zhì)收縮，皺褶形成，膠質(zhì)與濾泡上皮脫落，出現(xiàn)空暈；加冰醋酸后，組織結(jié)構(gòu)清晰，核著色清楚，核漿對(duì)比度好，組織無皺縮現(xiàn)象發(fā)生。

3.5 染色對(duì)組織

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?染色不充分時(shí)，鏡下顯示組織色澤偏紅，核對(duì)比度不強(qiáng)，影響診斷；染色充分后，鏡下組織結(jié)構(gòu)清晰完整，核漿紅藍(lán)對(duì)比鮮明。

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