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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒陰性對照孔操作流程

時間:2018/4/17閱讀:1665
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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒具有活絡(luò)、特異、簡略、快速、安穩(wěn)及易于自動化操作等特色。不只適用于臨床標本的查看,并且因為一天之內(nèi)能夠查看幾百乃至上千份標本,因而,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。ELISA法是免疫確診中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的流行癥、寄生蟲病及非流行癥等方面的免疫確診。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,依據(jù)現(xiàn)已運用的成果,本法不只能夠用來測定抗體,并且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種前期確診的杰出辦法。
操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔參加待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,參加純細胞裂解液100μl。 (2)酶標板置4℃,包被。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反響液,用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去),之后將洗刷液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖擺。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗刷3-4次。
(4)陰性對照孔每孔參加PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔參加1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,悄悄混勻10s,置37℃暗處反響15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反響。
(12)別離測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終究測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以削減由容器上的劃痕或指印等形成的光干擾。
(13)抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,核算S/N值。S/N≥2.1為陽性斷定規(guī)范。
Isosorbide (75% solution)    1g    異75%溶液標準品    652-67-5 
Isotretinoin     200mg    標準品    4759-48-2 
Isoxsuprine Hydrochloride     200mg    異舒普林鹽酸鹽標準品    579-56-6 
Isradipine     200mg    依拉地平標準品    75695-93-1 
Itraconazole    100mg    標準品    84625-61-6 
Ivermectin     200mg    依維菌素標準品    70288-86-7 
Kawain    200mg    醉椒素標準品    500-64-1 
KDN    100mg    凱迪恩標準品    22594-61-2 
Ketoconazole     200mg    標準品    65277-42-1 
Ketoprofen     200mg    標準品    22071-15-4 
Ketorolac Tromethamine     200mg    標準品    74103-07-4 
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