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高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒實驗原理

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高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒說明書



檢測范圍:12.5pg/mL~400pg/mL

保存條件:2-8℃低溫保存

保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次。

試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。

選型:

產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T

96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本

48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本主要成分:酶標板,試劑,標準品等。

試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..

高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒試劑盒組成:

120 倍濃縮洗滌液30ml×1 瓶7終止液6ml×1 瓶

2酶標試劑6ml×1 瓶8標準品(270ng/L)0.5ml×1 瓶

3酶標包被板12 孔×8 條9標準品稀釋液1.5ml×1 瓶

4樣品稀釋液6ml×1 瓶10說明書1 份

5顯色劑 A 液6ml×1 瓶11封板膜2 張

6顯色劑 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 個

樣本要求:

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L5 號標準品150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液

1200ng/L4 號標準品150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

600ng/L 3 號標準品150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

300ng/L2 號標準品150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

150ng/L1 號標準品150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒使用方法:

測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 

高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒實驗注意事項:

1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

2、自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。

4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。

5、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。 

6、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

7、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

8、有效期:6個月。


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