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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)中抗原抗體的反應(yīng)

時(shí)間:2017-9-1閱讀:823
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 一、抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中抗體的結(jié)構(gòu)
抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig)。Ig 分五類,即IgG、IgA 、IgM、IgD 和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig 主要為 IgG 和IgM。Ig 由兩個(gè)輕鏈(L)和兩個(gè)重鏈(H)的單體組成。Ig 的輕鏈?zhǔn)窍嗤?,?kappa;(kappa)和λ(Lambda )兩種型別。五類Ig 的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG 和IgM 的重鏈分別稱為γ(gamma )鏈和μ(mu )鏈。重鏈和輕鏈的 N 端的氨基酸排列順序因各種抗體而異,稱為可變區(qū),分別用VH 和VL 表示。兩者構(gòu)成抗體的抗原結(jié)合部位,只與相應(yīng)的抗原決定簇匹配,發(fā)生特異性結(jié)合,是抗體專一性結(jié)合抗原的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。
IgG 可被木瓜蛋白酶分解為三個(gè)區(qū)段,其中兩個(gè)相同的區(qū)段稱抗原結(jié)合片段(Fab )。每個(gè)Fab 都保存結(jié)合抗原的能力,但只有一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn),是單價(jià)的,與抗原結(jié)合后不出現(xiàn)凝集或沉淀。另一區(qū)段稱Fc 段,無(wú)抗體活性,但具有IgG *的抗原性。
IgG 可被分解為兩個(gè)片段,一個(gè)Fab 雙體,稱F(ab’)2,能和兩個(gè)相同的抗原結(jié)合;另一片段類似Fc,隨后被分解成小分子多肽,無(wú)生物活性。
IgM 是由五個(gè)單體組成的五聚體,含 10 個(gè)重鏈和10 個(gè)輕鏈,具有10 個(gè)抗原結(jié)合價(jià),由于空間位置的影響,只表現(xiàn)為五個(gè)抗原結(jié)合價(jià)。IgM 分子量約為900000, IgG 分子量約為150000 。
機(jī)體被微生物感染后,先產(chǎn)生 IgM 抗體,然后產(chǎn)生IgG 抗體。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間,IgM 抗體量逐漸減少而消失,而IgG 抗體可存在,在疾病*后可持續(xù)數(shù)年之久。IgM 抗體一般為保護(hù)性抗體具有免疫性。因此IgM 抗體的測(cè)定,對(duì)某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價(jià)值。右圖為為甲型肝炎病人血清中IgG 抗體和IgM 抗體出現(xiàn)的時(shí)間和水平。
二、 抗原抗體反應(yīng)
2.1 可逆性
Ag·Ab 的解離程度與K 值有關(guān)。高親和力抗體的抗原結(jié)合點(diǎn)與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合,兩者結(jié)合牢固,不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性,因此可用親和層析法來(lái)提純抗原或抗體。在抗血清中,特異性的IgG 抗體僅占總IgG 中的極小部分。用親和層析法提取的特異性抗體,稱為親和層析純抗體,應(yīng)用于免疫測(cè)定中可得到更好的效果。
2.2 zui適比例
在恒定量的抗體中加入遞增量的抗原形成抗體復(fù)合物(沉淀)的量見(jiàn)圖1-4。曲線的高峰部分是抗原抗體比例zui合適的范圍,稱為等價(jià)帶(zone of equivalence )。在等價(jià)帶前后分別為抗體過(guò)剩帶和抗原過(guò)剩帶。
如果抗原或抗體極度過(guò)剩,則無(wú)沉淀物形成,抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒在免疫測(cè)定中稱為帶現(xiàn)象(zone phenomenon )。抗體過(guò)量稱為前帶(prezone),抗原地過(guò)量稱為后帶(postzone)。在用免疫學(xué)方法測(cè)定抗原時(shí),應(yīng)使反應(yīng)系統(tǒng)中有足夠的抗體量,否則測(cè)得的量會(huì)小于實(shí)際含量,甚至出現(xiàn)假陰性。
Indomethacin     YSRIBIO911    53-86-1     200mg    標(biāo)準(zhǔn)品
Inositol     YSRIBIO910    87-89-8     500mg    肌醇標(biāo)準(zhǔn)品
Insulin    YSRIBIO909    9004/10/8    100mg    胰島素標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃)
Insulin (Beef)    YSRIBIO908    11070-73-8     100mg    胰島素(牛)標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃)
Insulin Lispro    YSRIBIO907    133107-64-9     5.97mg    賴脯胰島素標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃)
Iodipamide     YSRIBIO906    606-17-7     200mg    標(biāo)準(zhǔn)品
Iodixanol     YSRIBIO905    92339-11-2     200mg    標(biāo)準(zhǔn)品
Iodoquinol    YSRIBIO904    83-73-8     100mg    碘代對(duì)苯二酚標(biāo)準(zhǔn)品
Iohexol     YSRIBIO903    66108-95-0     200mg    標(biāo)準(zhǔn)品
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

 

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