細胞簡介：

膈肌是位于胸腔與腹腔之間的肌肉纖維組織，其周圍為肌腹，中央為腱膜，是機體重要的呼吸肌。

組織學(xué)上，膈肌屬骨骼肌，成熟的骨骼肌纖維不具有增殖能力。骨骼肌衛(wèi)星細胞是骨骼肌與肌膜之間的一種體積較小的細胞，排列在肌纖維的表面，當(dāng)肌纖維損傷后，可分化為肌纖維修復(fù)損傷。隨著組織發(fā)育的成熟，肌衛(wèi)星細胞數(shù)量相對減少。

細胞特性：

1）細胞來源于實驗動物正常膈肌組織。

2）細胞鑒定：肌動蛋白（α-actin）熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細胞生長方式：長梭狀細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf原代骨骼肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒 ，英文名： MYO ELISA Kit

Rat 1,3- beta D Pouguese glucosidase (1,3- beta D glucosidase) ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)檢測試劑盒

RatCathepsinK,cath-KELISAKit 大鼠組織蛋白酶K(cath-K)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforET3游離三甲狀腺原T3

細胞賴羥化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Ratmaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)檢測試劑盒

HEPACAM2重組大鼠 HepaCAM2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2 0.5mgGABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基A型受體B2抗原

FLRT1重組人 FLRT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白

LY9 Protein Mouse 重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2 0.5mgGABABR2/GB2(GABA B Receptor 2) γ1氨基A型受體B2抗原

ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白

HEPACAM2重組大鼠 HepaCAM2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LY9 Protein Mouse 重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FLRT1重組人 FLRT1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

豬骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/OCN/BGP)ELISA 試劑盒

Human connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)檢測試劑盒

PorcineHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit 豬熱休克蛋白40(HSP-40)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAlpha-FodrinIgG/IgA(Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA)ELISAKit人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA

血液精(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

Pisumsativumagglinin,PSAELISAKit豌豆凝集素(PSA)檢測試劑盒

小鼠膈肌細胞豬補體蛋白3檢測試劑盒   豬補體蛋白3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬補體蛋白3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬補體蛋白3試劑盒、豬補體蛋白3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬表皮生長因子檢測試劑盒   豬表皮生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬表皮生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬表皮生長因子試劑盒、豬表皮生長因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬白血病抑制因子受體檢測試劑盒   豬白血病抑制因子受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬白血病抑制因子受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬白血病抑制因子受體試劑盒、豬白血病抑制因子受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

豬白細胞介素15檢測試劑盒   豬白細胞介素15試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬白細胞介素15試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬白細胞介素15試劑盒、豬白細胞介素15eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。