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產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 貨號 | EY-XY3624 |
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組織來源 | 主動脈組織 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞簡介:
腹腔主動脈是人體的大動脈,直接延續(xù)于發(fā)自左心室的主動脈,胸腔主動脈,沿脊柱左側下行,主要負責腹腔臟器和腹壁的血液供應。主動脈是由內膜、中層彈力層和外膜構成,三層緊密貼合在一起。
其中,外膜是專門的支持組織,外膜成纖維是外膜的主要成分,在血管炎癥反應、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用。
產品名稱 | 組織來源 | 主動脈組織 | |
英文名稱 | Mouse primary abdominal aortic outer membrane fibroblasts | 產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
2)細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 DELF原代成纖維細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
公司正在出售的產品:
大鼠內向整流型鉀離子通道亞家族J成員5(KCNJ5)elisa檢測試劑盒
平滑肌細胞相關蛋白4抗體
MFSD1
1號染色體開放閱讀框177抗體
C1orf177
組織血管緊張素Ⅰ轉化酶(ACE)總活性比色法定量檢測試劑盒
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磷酸化磷脂酰肌醇激酶調節(jié)亞單位gamma抗體
phospho-PIK3R3 (Tyr199)
卷曲螺旋結構域蛋白5抗體
CCDC5
Toll樣受體9抗體 Anti-TLR9/CD289
多腺苷二磷酸多聚酶16抗體 Anti-PARP16
神經叢蛋白A4抗體 Anti-Plexin A4
細胞外基質蛋白2抗體 Anti-SPARCL1/Ecm2
Cy5標記的兔抗豚鼠IgG H&L
Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy5
胰腺彈性蛋白酶3B抗體
Elastase 3B
鋅指蛋白BED4抗體 Anti-ZBED4
生殖細胞增殖相關蛋白NANOS2抗體 Anti-NANOS2
腫瘤血管內皮調節(jié)蛋白Robo4抗體 Anti-Robo4
骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 Anti-Sclerostin
大鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)elisa分析檢測試劑盒
微管蛋白4α抗體 Anti-TUBA4A
馬IgG(親和純化)
Horse IgG
小鼠腹腔主動脈外膜成纖維細胞丙型肝炎病毒E12A
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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