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所 在 地上海市
更新時間:2019-01-14 10:25:37瀏覽次數(shù):641次
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
OPN DRGelisa試劑盒說明書 | Rat Osteopontin/OPN ELISA Kit | 來電可享受優(yōu)惠 |
大鼠骨橋素 OPN DRGelisa試劑盒 Rat Osteopontin/OPN ELISA Kit
OPN DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】骨橋素Osteopontin,OPN,又名Eta-1,是一種分泌型多功能糖蛋白。其可能功能包括骨代謝、免疫調(diào)節(jié)、傷口愈合、細胞存活和腫瘤的發(fā)展。OPN主要由骨、腎、上皮組織合成。OPN在體內(nèi)合成時,前體有314個氨基酸,成熟蛋白質(zhì)298個氨基酸,呈酸性。由于糖化程度不同,分子量從33-75KDa。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.OPN DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
操作流程:
(1)OPN DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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巨噬細胞集落刺激因子MCSF檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
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牙本質(zhì)涎磷蛋白DSPP檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
牙骨質(zhì)蛋白1CEMP1檢測試劑盒 規(guī)格: 48T/96T
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n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷 1g n-Octyl-β-D-Glucopyranoside (OGP) -20℃保存
1,4- 雙丙烯?!?g PDA(1,4-Bis(acryloyl)piperazine) 常溫干燥避光保存
G 鈉鹽 1g Penicillin G Sodium Salt 室溫保存
吩嗪硫酸甲酯 1g Phenazine Methosulfate(PMS) 室溫保存
苯磺酰氟 1g Phenylmethyl Sulfonyl Fluoride(PMSF) 室溫保存
多聚半乳糖醛酸鈉鹽 1g Polygalacturonic Acid Sodium Salt 室溫保存
1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯 1g POPOP(1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene) 室溫保存
硫酸鹽 1g Protamine Sulfate Salt 室溫干燥保存
5- 磷酸吡哆醛,一水 1g Pyridoxal 5-Phosphate, Monohydrate -20℃保存
1g Pyridoxamine HCl -20℃避光保存
魚藤酮 1g Rotenone 室溫避光保存
芥子酸 1g Sinapic Acid 室溫干燥保存
鹽酸 1g Spectinomycindihydrochloride Pentahydrate 4℃保存
四鹽酸精胺 1g Spermidine 4HCl 室溫保存
亞精胺三鹽酸鹽 1g Spermidine Trihydrochloride -20℃保存
OPN DRGelisa試劑盒說明書人肺成纖維細胞,HPF細胞 原裝/進口 5 ml
人肝Kuffer細胞 5 ml
人肝癌 * 5 ml
人肝單核細胞,HLMC細胞 原裝/進口 500 ml
人肝竇內(nèi)皮細胞,HHSECP細胞 500 ml
小鼠胚胎細胞,NIH/3T3細胞 * 500 ml
小鼠前胃癌細胞,MFC細胞 原裝/進口 500 ml
小鼠癌高轉(zhuǎn)移細胞,MA-891細胞 5 ml
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