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Annexin A5 DRGelisa試劑盒說明書

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更新時(shí)間:2019-01-14 10:46:42瀏覽次數(shù):691次

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Annexin A5 DRGelisa試劑盒說明書服務(wù)承諾:
一、質(zhì)量保證,有問題免費(fèi)包換;
二、提供免費(fèi)代測服務(wù)(為客戶提供來樣檢測服務(wù),zui大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性);
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

價(jià)格

Annexin A5 DRGelisa試劑盒說明書

Rat Annexin A5 ELISA Kit

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大鼠膜聯(lián)蛋白A5(Annexin A5)DRGelisa試劑盒 Rat Annexin A5 ELISA Kit
Annexin A5 DRGelisa試劑盒說明書【實(shí)驗(yàn)用途】Annexin A5(膜聯(lián)蛋白A5), 膜聯(lián)蛋白A5是一個Ca~(2+)依賴的磷脂結(jié)合蛋白家族,從上世紀(jì)70年代末發(fā)現(xiàn)*個膜聯(lián)蛋白至今,在脊椎類生物中已發(fā)現(xiàn)了12個家族成員。它們在結(jié)構(gòu)上都具有高度保守的C末端。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.Annexin A5 DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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操作流程:
(1)Annexin A5 DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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大鼠牙髓干細(xì)胞原代細(xì)胞 原裝/進(jìn)口 20 reactions

大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞  200 µg

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人小膠質(zhì)細(xì)胞裂解物   HML 原裝/進(jìn)口 10 µg

人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞裂解物   HDMECL  5 x 10^5 cells/vial

人真皮淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物   HDLECL * 20 reactions

人表皮角質(zhì)細(xì)胞裂解物   HEKL 原裝/進(jìn)口 20 reactions

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