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小鼠ELISA試劑盒測定系統(tǒng)的表達

時間：2018/10/25閱讀：884

小鼠ELISA試劑盒測定小分子量物質(zhì)常用競爭法，其標準曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負相關(guān)。標準曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。注意橫坐標為對數(shù)關(guān)系，這更有利于測定系統(tǒng)的表達。

、血清

血清是常用于ELISA檢測的一類樣本，處理也比較簡單。

用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本，將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜，使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的析出。)4℃000×g離心20分鐘，仔細收集上清。建議將血清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。

ELSIA試劑盒采血過程中應(yīng)避免溶血，因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì)，在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色，而導(dǎo)致檢測的不準確性。同時也應(yīng)避免細菌污染，因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測的假陽性。

2、血漿

用含抗凝劑的或離心管采集血液標本，標本采集后30min內(nèi)4℃000×g離心5min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

常用的抗凝劑為EDTA、和等，檢測時還應(yīng)仔細閱讀試劑盒說明書，檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。

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