TPS 試劑盒標(biāo)本激活方法:

1. 將450ul 標(biāo)本稀釋液加入到一支 1.5ml 進(jìn)口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標(biāo)本。

2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊，上下混勻。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。

3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊，上下混勻。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計(jì)算結(jié)果時(shí)乘 以稀釋倍數(shù) 50 。 （ 注意：不同的標(biāo)本E2F1 的水平可能有較大差異，請根據(jù)實(shí)際情況靈活掌握稀釋度）

5. 細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標(biāo)本稀釋液＋ 50ul 樣本＋ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。

結(jié)果計(jì)算與判斷

1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。

2. 以標(biāo)準(zhǔn)品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標(biāo)， OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) E2F1 含量 ，再乘上稀釋倍數(shù)即可 。

試劑盒性能

1. 靈敏度 ： 最小的E2F1 檢測濃度小于 15 pg/ml。

2. 特異性： 可同時(shí)檢測重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9％。

人骨肉瘤細(xì)胞；HOS

人慢性髓系白血病細(xì)胞；K562

人前列腺癌細(xì)胞；LNCaP

人乳腺癌細(xì)胞；MCF 7B

人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞；MOLT-4

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H209

黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞；RAJI

人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞；RAMOS

人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞；RAMOS(RA.1)

人腦瘤細(xì)胞；SF126

人腦瘤細(xì)胞；SF763

人腦瘤細(xì)胞；SF767

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1

人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞；SW-13

人結(jié)直腸癌細(xì)胞；T84

人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞；THP-1

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞；U251

人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；U937 [U-937]

人胃腺癌細(xì)胞；BGC-823

人低分化肺腺癌細(xì)胞；GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮細(xì)胞；Hep-2

人纖維肉瘤細(xì)胞；HT-1080

人絨癌細(xì)胞；JEG-3

人耐VP16絨癌細(xì)胞株；JEG-3/VP16

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞；JEG-3/VP16-IL-2

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞；JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；Jurkat, Clone E6-1

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；BE(2)-M17