豬細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用目的:
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中豬細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)小病毒抗體(PV-Ab),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)濃度。
相關(guān)產(chǎn)品:
開環(huán)異落葉松樹脂酚 含量: ≥98% Secoisolariciresinol *
老鸛草素 含量: 97% Geraniin 進口,*
次堿 含量: ≥98% wilforine 進口/國產(chǎn)
定堿 含量: ≥97% wilfordine 現(xiàn)貨供應(yīng)
紅素 含量: ≥98% Celastrol (Tripterin, Tripterine) *
南蛇藤素 含量: ≥98% Celastrol (Tripterin, Tripterine) 進口,*
吉堿 含量: ≥97% wilforgine 進口/國產(chǎn)
櫟櫻酸 含量: ≥98% Roburic acid 現(xiàn)貨供應(yīng)
豬細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
32ng/L
5號標(biāo)準(zhǔn)品
50μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ng/L
4號標(biāo)準(zhǔn)品
50μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
8ng/L
3號標(biāo)準(zhǔn)品
50μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4ng/L
2號標(biāo)準(zhǔn)品
50μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2ng/L
號標(biāo)準(zhǔn)品
50μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
豬細(xì)小病毒抗體(PV-Ab)酶聯(lián)免疫分析試劑盒測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。