GL-261+luc小鼠膠質細胞瘤熒光素酶標記

商品屬性

商品介紹

細胞數(shù)量：1*10^6

細胞運輸：干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

培養(yǎng)基：準備DMEM87%培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；GlutaMAX-1谷an酰胺，1%；HEPES 1M Buffer solution  ，1%；P/S青霉su-鏈霉su，1%。

培養(yǎng)條件：培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

細胞凍存：液氮凍存（90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配）

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質受體(抗原)

CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白

CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein

Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質受體(抗原)

SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白

TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆?？贵w(ANGA)檢測試劑盒

Humanclusterin,CLUELISAKit 人凝聚素(CLU)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor8-OHdG(Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine)ELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥苷

乙酸待測樣品處理試劑盒20次

Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit小鼠髓過氧化物酶(MPO)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

GL-261+luc小鼠膠質細胞瘤熒光素酶標記血紅素氧化酶   英文名稱：   heme oxygenase-1   規(guī)格：      英文縮寫：   HO-1

熱休克蛋白27   英文名稱：   Heat shock protein 27   規(guī)格：      英文縮寫：   HSP27

熱休克蛋白70   英文名稱：   Heat shock protein 70   規(guī)格：      英文縮寫：   HSP70

HA絲酸肽酶1   英文名稱：   high temperature requireme A   規(guī)格：      英文縮寫：   Ha 1

大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)檢測試劑盒 ，英文名： BMPR-Ⅱ ELISA Kit

Porcine procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測試劑盒

流感嗜血桿菌(Hi)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMLC(HumanMyosinlightChain)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈

體液脊髓過氧化酶(MPO)活性(DTNB)高質敏感比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitHCⅡ犬肝素輔因子Ⅱ

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。