[測定方法] ELISA法
[方法學(xué)原理] 將戊型肝炎病毒（HEV）特異性抗原預(yù)包被于微孔反應(yīng)板上，樣品加入已有樣品稀釋液的反應(yīng)孔中，在隨后的溫育過程中，若樣品中含特異性抗體（HEVAb-IgG），則該抗體與包被抗原形成抗原—抗體復(fù)合物被吸附到微孔板上，再加入酶標(biāo)記的第2抗體，zui終形成抗原—抗體—酶標(biāo)記第2抗體復(fù)合物，洗滌除去未結(jié)合的游離酶，加入顯色劑后顯色。反之，若樣品中不含特異性抗體（HEVAb-IgG），則加入顯色劑后不顯色。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 靜脈抽血2ml，不抗凝。
[試劑]
1．包被反應(yīng)板
2．樣品稀釋液
3．陰性對照
4．陽性對照
5．洗滌劑
6．酶標(biāo)記第2抗體
7．顯色劑A、B
8．終止液
[儀器設(shè)備] 酶標(biāo)儀或全自動酶聯(lián)免疫檢測儀。
[測定步驟]
1．用加樣器在微孔反應(yīng)條板孔中加入樣品稀釋液，每孔100u1。
2．將待測標(biāo)本各10ul分別加入已有樣品稀釋液的各孔中，直接加陰性對照、陽性對照各100u1，設(shè)空白對照1孔。
3．充分混勻，37℃環(huán)境中溫育20min。
4．傾去內(nèi)容物，用洗滌液洗板5次，確保每次吸凈無殘留，全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
5．各孔加入酶標(biāo)記第2抗體100ul，振蕩混勻。
6．傾去內(nèi)容物，用洗滌液洗板5次，確保每次吸凈無殘留，全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
7．每孔加入顯色劑A、B各1滴，顯色10rain。
8．終止顯色后，在酶標(biāo)儀上比色（波長為450nm），樣品吸光度大于陰性對照2．1倍者為陽性。
[注意事項(xiàng)]
1．整個檢測過程應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量手冊和生物安全守則規(guī)定，嚴(yán)防交叉污染。
2．所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
3．試劑應(yīng)保存于2～8℃冰箱，使用前應(yīng)在室溫環(huán)境中平衡30min。
4．洗滌時各孔均應(yīng)加滿洗滌液，防止孔內(nèi)有游離酶未洗凈，每次洗板后均應(yīng)在吸水紙上扣干。
[正常參考值] HEVAbqgG陰性
[臨床意義] HEVAb-IgG陽性出現(xiàn)時間較HEVAb-IgM略晚，但持續(xù)時間相對較長，個別患者病愈14年后HEVAb-IgG仍為陽性。一般HEVAb—IgG于急性期含量較高，恢復(fù)期則明顯下降，經(jīng)過一定時期后，有相當(dāng)比例患者的抗HEVAb-IgG消失，并非終身存在。因此，檢測HEVAb-IgG并不能*反映人群既往感染水平。
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