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化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測定

閱讀：379發(fā)布時間：2011-1-8

化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測定（chemilumines centimmunoassay，CLIA），是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的一類免疫測定方法。用作標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光劑應(yīng)符合以下4個條件：
①能參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)；
②與抗原或抗體耦聯(lián)后能形成穩(wěn)定的結(jié)合物試劑；
③耦聯(lián)后仍保留高的量子效應(yīng)和反應(yīng)動力；
④反應(yīng)不改變或極少改變被標(biāo)記物的理化特性，特別是免疫反應(yīng)性。

魯米諾類和吖啶酯類均是常用的標(biāo)記發(fā)光劑。魯米諾類的發(fā)光反應(yīng)須有催化劑催化，且與蛋白質(zhì)或肽結(jié)合后其發(fā)光作用減弱，因此魯米諾類在CLEIA中不是很好的標(biāo)記物，現(xiàn)已較少用于CLIA中。而吖啶酯類對CLIA更為適用，其顯著的優(yōu)點(diǎn)是：①氧化反應(yīng)不需催化劑，只要堿性環(huán)境中就可以進(jìn)行，發(fā)光反應(yīng)迅速，本底低。②在氧化反應(yīng)過程中，結(jié)合物被分解，因此游離吖啶酯的發(fā)光不受抑制，試劑穩(wěn)定性好。其具體原理是將標(biāo)記有吖啶酯的抗原（或抗體）與待測樣本中的抗體（或抗原）反應(yīng)后，加入H202溶液，后者與吖啶酯發(fā)生氧化反應(yīng)，使吖啶酯放出光子，而光子的強(qiáng)度則與被測物的濃度成正比，因此測定反應(yīng)產(chǎn)物的發(fā)光強(qiáng)度即得到被測物的濃度。

 


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