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弓形蟲病診斷免疫學方法

閱讀:710發(fā)布時間:2011-2-26

免疫學方法是目前該病的常用重要實驗診斷方法。如方法應用得當,結果判斷準確,能達到較好的輔助診斷目的。急性期以檢出特異性IgM抗體或循環(huán)抗原為可靠指標,也可觀察特異性IgG抗體的動態(tài)變化,慢性期則以檢測IgG抗體為主。弓形蟲病的血清學診斷方法有間接血凝試驗、間接熒光抗體試驗、染料試驗、皮內變態(tài)反應和瓊脂擴散試驗等。染色試驗是敏感可靠的方法,主要用于早期診斷。間接血凝試驗用做流行病學調查。變態(tài)反應多用于人的檢查和獸醫(yī)檢查豬。國內應用較為廣泛的是間接血凝試驗。

染色試驗(DT) 為弓形蟲病經典而*的血清學診斷方法。其原理為;在含有輔助因子(補體)的新鮮血清參與下,待測血清中特異性抗體使蟲體細胞變性而不為美藍著色。鏡檢見半數以上蟲體不著色者為陽性,半數以上蟲體著色者為陰性。該法必須用活速殖子為抗原,含輔助因子的正常血清須經篩選獲得,由于篩選輔助因子較困難而使應用受到一定限制。呂元聰等(1994)以弓形蟲碎片為抗原,建立的免疫酶染色試驗(1EST)與DT的檢測結果在已知和未知血清標本中差異無顯著性(P>0.05)。該法操作簡便,不需特殊設備,便于基層推廣應用。Dando等(2001)用表達p:—半乳糖苷酶的轉基因弓形蟲速殖子的補體介導的溶解試驗檢測患者血清的弓形蟲特異性抗體,比Sabin-Feldman染色試驗簡便、有效。

皮下試驗(1CT) Netrebko(2003)用ICT檢測了5472例確診為弓形蟲病患者的免疫力,陽性率54.28%,認為ICT方法簡便、經濟。

間接血凝試驗(1HA) 由于該法簡便、快速,具有良好的特異性與敏感性,加之商品試劑易獲得,故被廣泛使用。本法所測抗體在感染后出現較晚,較適宜用于隱性感染及血清流行病學調查。但該法重復性欠佳,偶因非特異性凝集出現假陽性反應。

間接熒光抗體試驗(1FA) 以熒光標記第二抗體,用完整的速殖子作抗原,檢測待檢血清中的IgM或IgG抗體。此法具有高度的特異性、敏感性與穩(wěn)定性,簡便快速:由于所測抗體多為蟲體表膜抗原誘導的特異性抗體,因此具有早期診斷價值。血清中有類風濕因子或抗核抗體時可出現假陽性反應。

 


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