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病毒中和試驗(yàn)（VNT）診斷禽流感

閱讀：2215發(fā)布時(shí)間：2011-3-19

以中和試驗(yàn)來鑒定或滴定流感病毒時(shí)，常用雞胚或組織培養(yǎng)細(xì)胞，操作方法與其他病毒（如NDV）的中和試驗(yàn)相同。一般常用固定病毒稀釋血清法，IOOEIDs。或1000TCID5。的AIV與RED處理過的倍比稀釋的血清等量混合，室溫lh，每個(gè)雞胚或每瓶細(xì)胞接種o．2ml，每個(gè)稀釋度接種4個(gè)胚或細(xì)胞瓶，37~C孵育72h至7天，檢查雞胚尿囊液的血凝活性或細(xì)胞培養(yǎng)物的血細(xì)胞吸附作用，按標(biāo)準(zhǔn)方法算出中和效價(jià)，不出現(xiàn)血凝活性或血細(xì)胞吸附作用的zui高稀釋度即為血清中和抗體滴定。

NT試驗(yàn)是zui敏感而特異的血清學(xué)方法，只有抗體與病毒顆粒上的表面抗原相對(duì)應(yīng)、特別是與吸附到宿主細(xì)胞上的病毒表面抗原相對(duì)應(yīng)時(shí)，才能在試驗(yàn)中取得滿意的顯示效果。因此，某一個(gè)血清型的中和試驗(yàn)抗體只與同組內(nèi)地其他病原表現(xiàn)出有限的交叉反應(yīng)。由于病毒中和試驗(yàn)操作煩瑣，耗時(shí)費(fèi)料，臨床上幾乎不用，但作為經(jīng)典方法在病毒鑒定中起著重要的作用，許多新的檢測(cè)方法都要以之為標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行比較。

 


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