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閱讀:2240發(fā)布時間:2011-3-19
以中和試驗來鑒定或滴定流感病毒時,常用雞胚或組織培養(yǎng)細胞,操作方法與其他病毒(如NDV)的中和試驗相同。一般常用固定病毒稀釋血清法,IOOEIDs?;?000TCID5。的AIV與RED處理過的倍比稀釋的血清等量混合,室溫lh,每個雞胚或每瓶細胞接種o.2ml,每個稀釋度接種4個胚或細胞瓶,37~C孵育72h至7天,檢查雞胚尿囊液的血凝活性或細胞培養(yǎng)物的血細胞吸附作用,按標(biāo)準(zhǔn)方法算出中和效價,不出現(xiàn)血凝活性或血細胞吸附作用的zui高稀釋度即為血清中和抗體滴定。
NT試驗是zui敏感而特異的血清學(xué)方法,只有抗體與病毒顆粒上的表面抗原相對應(yīng)、特別是與吸附到宿主細胞上的病毒表面抗原相對應(yīng)時,才能在試驗中取得滿意的顯示效果。因此,某一個血清型的中和試驗抗體只與同組內(nèi)地其他病原表現(xiàn)出有限的交叉反應(yīng)。由于病毒中和試驗操作煩瑣,耗時費料,臨床上幾乎不用,但作為經(jīng)典方法在病毒鑒定中起著重要的作用,許多新的檢測方法都要以之為標(biāo)準(zhǔn)來進行比較。
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