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新城疫病毒強(qiáng)化試驗(yàn)(END)病毒分離與增毒試驗(yàn)診斷豬瘟

閱讀:9422發(fā)布時(shí)間:2011-4-13

新城疫病毒強(qiáng)化試驗(yàn)

CSFV感染豬辜丸細(xì)胞后,不能使細(xì)胞發(fā)生CPE(細(xì)胞致病變效應(yīng))變化,但將雞新城疫病毒接種于該感染細(xì)胞,則該細(xì)胞發(fā)生CPE變化。

根據(jù)CSFV的這一特性可以對(duì)CSFV進(jìn)行檢測(cè)和診斷,即稱為雞新城疫病毒強(qiáng)化試驗(yàn)(exalation of NDV,END)。此方法的不足之處是直接將被檢病料處理后接種于細(xì)胞培養(yǎng)物,敏感性較低。若改用兩步法,即先將被檢病料處理后接種于豬脾細(xì)胞培養(yǎng)物,傳代適應(yīng)之后,再做END試驗(yàn),則可明顯提高其敏感性,但這樣檢測(cè)所需時(shí)間較長(zhǎng)。該方法適用于檢測(cè)那些易在豬源細(xì)胞中生長(zhǎng)的野毒,對(duì)大部分兔化弱毒株無(wú)效,其原因是有些病毒往往不能在豬辜丸細(xì)胞內(nèi)充分繁殖。優(yōu)點(diǎn):該方法具有較高的敏感性和重復(fù)性。缺點(diǎn):特異性差,有些弱毒株能引起END現(xiàn)象,且易散毒。

病毒分離與增毒試驗(yàn)

CSFV能在豬腎細(xì)胞和其他一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)增殖,敏感性zui強(qiáng)的細(xì)胞系是PK-巧、PK-2a和ST等幾株豬腎和豬睪丸細(xì)胞系。

豬瘟病毒CSFV的分離一般采取病死豬的脾或淋巴結(jié)等含毒較高的組織,經(jīng)研磨后用0.45rmi濾膜過(guò)濾,將濾液中病毒接種于敏感細(xì)胞進(jìn)行分離,在接種病毒1天、2天、3天后進(jìn)行免疫酶染色或免疫熒光染色、鏡檢。病毒分離鑒定方法具有準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn),但此法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,且CSFV在傳代過(guò)程中易發(fā)生變異,不利于對(duì)病毒核酸序列的分析。

 


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