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閱讀:26發(fā)布時(shí)間:2022-9-13
紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定維生素B2的方法步驟:
1、 待測(cè)液的配置:取待測(cè)片劑2片,精密稱定、研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于維生素B210 mg),置于1000 mL容量瓶中,加冰醋酸5mL與水100mL,置水?。?/span>100 ℃)加熱1小時(shí),時(shí)時(shí)搖振,使維生素B2溶解,加水稀釋,冷卻后加氫氧化鈉液(1 mol/L)30 mL。用水稀釋至刻度,搖勻,過(guò)濾;棄去初濾液,取續(xù)濾液作為待測(cè)液。
2、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置:準(zhǔn)確稱取75mg核黃素(維生素B2),置于1000 mL容量瓶中,加少量水使維生素B2溶解,zui后加水定容至刻度得到維生素B2標(biāo)準(zhǔn)試劑(0.075 mg/mL)。
3、 用移液管分別吸取2mL、4mL、5mL、6mL、8mL維生素B2標(biāo)準(zhǔn)試劑(0.075 mg/mL) 于5個(gè)25 mL容量瓶中, 加水定容至刻度,搖勻。用紫外分光光度計(jì)分別測(cè)量5個(gè)容量瓶中的VB2稀釋液,得到5個(gè)吸收度數(shù)值A444nm。
4、以VB2稀釋液濃度為橫坐標(biāo),A444nm數(shù)值為縱坐標(biāo),建立VB2濃度與吸收度的標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后在444nm波長(zhǎng)處測(cè)出待測(cè)液的吸收度數(shù)值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到相應(yīng)的濃度數(shù)值即可。
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