國產(chǎn)液相色譜儀的洗脫方式可分為洗脫溶劑固定洗脫和梯度洗脫兩種。兩種洗脫方式有什么區(qū)別呢?本文將一一介紹。
一、洗脫溶劑固定洗脫(一種或幾種固定溶劑組成的洗脫液，有人稱之為等度洗脫)
一般是采用一種或幾種固定混合的溶劑作流動相，對色譜柱進(jìn)行洗脫，其優(yōu)點是操作簡單、使用成本低(只需要一個高壓泵)。其缺點是分析時間長、分析速度慢、分析效率差。目前的很多分析工作大多數(shù)采用梯度洗脫。
二、梯度洗脫
根據(jù)色譜分離理論，決定組分保留值的因素是分配系數(shù)和分配比;而分配比又叫做容量因子，它表征組分在固定相和流動相中分配量的比。梯度洗脫是用一種或多種不同極性的溶劑作為流動相，在洗脫過程中不斷改變流動相組分的比例，以此調(diào)節(jié)流動相的極性，使國產(chǎn)液相色譜儀色譜柱流出物(樣品)中的所有組分都有合適的分配比或容量因子，以保證能夠在zui短的時間內(nèi)，達(dá)到分離的目的。梯度洗脫可以提高柱效，加快分析速度，縮短分析時間，并且可以改善液相色譜系統(tǒng)中檢測器的檢測限，提高靈敏度。
梯度洗脫的優(yōu)點：分離效率高、分析速度快;往往等度洗脫不能解決問題時，采用梯度洗脫就迎刃而解了。所以，梯度洗脫發(fā)展很快，使用非常廣泛。
國產(chǎn)液相色譜儀在進(jìn)行梯度洗脫時，由于多種溶劑混合，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題，必須充分重視：
1.要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相，有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶，超出范圍就不互溶，使用時更要引起注意。當(dāng)有機(jī)溶劑和緩沖液混合時，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
2.梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高，以保證良好的重現(xiàn)性。進(jìn)行樣品分析前必須進(jìn)行空白梯度洗脫，以辨認(rèn)溶劑雜質(zhì)峰，因為弱溶劑中的雜質(zhì)富集在色譜柱頭后會被強(qiáng)溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需*脫氣，以防止混合時產(chǎn)生氣泡。
3.每次梯度洗脫之后必須對色譜柱進(jìn)行再生處理，使其恢復(fù)到初始流動相流經(jīng)色譜柱，使固定相與初始流動相達(dá)到*平衡。
4.混合溶劑的粘度常隨組成而變化，因而在梯度洗脫時常出現(xiàn)壓力的變化。例如甲醇和水粘主度都較小，當(dāng)二者以相近比例混合時粘度增大很多，此時的柱壓大約是甲醇或水流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過或色譜柱能承受的zui大壓力。
以上是國產(chǎn)液相色譜儀的兩種洗脫方式，更多信息咨詢南京科捷。
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