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技術(shù)文章

江蘇/北京 液相色譜儀的分析方法優(yōu)化剖析

閱讀:38發(fā)布時間:2022-10-9

江蘇/北京 液相色譜儀的分析方法優(yōu)化剖析: 

1.要求標(biāo)準:

  確保分析系統(tǒng)的所有的分離組分達到規(guī)定要求(保證組分的重復(fù)性),在此基礎(chǔ)上盡量縮短分析時間;
 
2.尊重原分析方法,用標(biāo)準品測試分析方法;
 
3.用溶解樣品的溶劑做空白,確定溶劑峰在色譜圖上的出峰時間;
 
4.用配好的一定濃度的標(biāo)準品進針,確定標(biāo)準品峰在色譜圖上的出峰時間。
  
a.如果標(biāo)準品峰與溶劑峰重疊或者分離不好,則要調(diào)整流動相(例如,反相色譜系統(tǒng)需要增加水和緩沖液的比例,減少有機溶液的比例)或者選用長一些的色譜柱。
  
b.如果標(biāo)準品峰在進針后很長時間沒有出峰,就需要耐心等待出現(xiàn)標(biāo)準品峰,只有出現(xiàn)標(biāo)準品峰,才有可能去調(diào)整流動相(例如,反相色譜系統(tǒng)需要減少水和緩沖液的比例,增加有機溶液的比例)或者選用短一些的色譜柱。 
 
5.對一些黏度比較大的流動相,則需要加裝色譜柱柱溫箱,以提高色
譜柱的溫度,降低流動相的黏度,縮短保留時間。
 
6.如何降低梯度分析的基線噪聲
           
  大家都知道在做等度分析中流動相是配好平衡好的,基線噪聲很小。而梯度分析則是水及水的緩沖液相與有機相在動態(tài)狀態(tài)下進行混合和平衡的,再加上恒流泵的脈動因素使其基線噪聲增大。從而降低了儀器的靈敏度。
以二元高壓梯度為例:
  將A泵以甲醇為流動相從90%變化到70%,B泵以水為流動相從10%變化到30%,進行梯度分析。改變?yōu)榕涑?0%甲醇水溶液和70%甲醇水溶液,分別用A泵輸送90%甲醇水溶液,用B泵輸送70%甲醇水溶液,進行梯度分析。這樣的混合方式可有效地降低基線噪聲。
 

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