亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

行業(yè)產(chǎn)品

  • 行業(yè)產(chǎn)品

上海酶聯(lián)生物研究所


當(dāng)前位置：上海酶聯(lián)生物研究所>資料下載>Western Blot之膜的選擇

    暫無信息


    暫無信息

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：4010條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：采購部 （經(jīng)理）

資料下載

Western Blot之膜的選擇

閱讀：1281發(fā)布時(shí)間：2011-05-30

  • 提供商

    上海酶聯(lián)生物研究所

  • 資料大小

    0K

  • 資料圖片

  • 下載次數(shù)

    0次

  • 資料類型

  • 瀏覽次數(shù)

    1281次

  • 免費(fèi)下載


Western Blot印跡常用的轉(zhuǎn)移膜主要是硝酸纖維素膜（Nitrocellulose Blotting Membranes，NC）和PVDF膜，此外也有用尼龍膜、DEAE纖維素膜做蛋白印跡。
選擇的根據(jù)主要有：
a. 膜與目的蛋白分子的結(jié)合能力（也就是單位面積的膜能結(jié)合蛋白的載量），以及膜的孔徑（也就是攔截蛋白的大小）；
b. 不影響后續(xù)的顯色檢測（也就是適和用于所選的顯色方法，信噪比好）；
c. 如果后繼實(shí)驗(yàn)有其他要求，比如要做蛋白測序或者質(zhì)譜分析，還要根據(jù)不同目的來挑選不同的轉(zhuǎn)移膜。
列表形式對主要的三種膜進(jìn)行比較。

 
NC膜
尼龍膜
PVDF膜
靈敏度和分辨率
高
高
高
背景
低
較高
低
結(jié)合能力
80－110 ug/cm2
>400 ug/cm2
125－200 ug/cm2（適合于SDS存在下與蛋白質(zhì)的結(jié)合）
材料質(zhì)地
干的NC膜易脆
軟而結(jié)實(shí)
機(jī)械強(qiáng)度高
溶劑耐受性
無
無
有
操作程序
緩沖液潤濕,避免氣泡
緩沖液潤濕
使用*%甲醇潤濕
檢測方式
常規(guī)染色，可用放射性和非放射性檢測
不能用陰離子染料
常規(guī)染色， 比較于NC膜，可用考馬斯亮藍(lán)染色，可用于ECL檢測，質(zhì)譜分析和快速免疫檢測。
適用范圍
0.45um 一般蛋白
0.2um一分子量小于20kD蛋白
0.1um一分子量小于7kD蛋白  低濃度小分子蛋白、酸性蛋白、糖蛋白和蛋白多糖（主要用在核酸檢測中）   糖蛋白檢測和蛋白質(zhì)測序。
價(jià)格
價(jià)格較便宜
便宜
較貴

 

硝酸纖維素膜
硝酸纖維素膜是蛋白印跡zui廣泛使用的轉(zhuǎn)移介質(zhì)，對蛋白有很強(qiáng)的結(jié)合能力，而且適用于各種顯色方法，包括同位素，化學(xué)發(fā)光（Luminol類）、常規(guī)顯色、染色和熒光顯色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很簡便，不需要甲醛預(yù)處理，只要在無離子水面浸潤排出膜內(nèi)氣泡，再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以了；NC膜很容易封閉，也不需要特別嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那逑礂l件。轉(zhuǎn)移到NC膜上的蛋白在合適的條件下可以穩(wěn)定保存很長時(shí)間，不過要注意的是純的硝纖膜在比較脆，又容易卷，操作要小心，不適合用于需要多次重復(fù)清洗的用途——因?yàn)榻?jīng)不起多次“折磨”。選擇硝纖膜時(shí)要注意的是選擇合適的孔徑，通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔徑的膜，小于20KD的話建議選擇0.2um的，如果小于7KD的話選擇0.1um的膜。另外還要注意選擇純的NC膜——混有含醋酸纖維（CM）的NC膜結(jié)合力會(huì)有所降低。另外提醒一句：由于NC膜上結(jié)合的蛋白會(huì)因?yàn)橐恍┤ノ蹌┒淮?，因此在封閉時(shí)使用較溫和的Tween20，而且濃度不要超過0.3%（據(jù)說0.05%效果）。一般而言，NC膜越純，其蛋白結(jié)合能力就越高，所以要增加WB的靈敏度和分辨率，提高所使用膜的純度是個(gè)可以考慮的選擇。如果NC膜攙雜一些醋化纖維素——這在前面已經(jīng)提到，會(huì)影響蛋白質(zhì)結(jié)合。Protran由于是純NC膜，比較脆，機(jī)械耐受力欠佳，需要小心操作，如果擔(dān)心自己“粗手粗腳”，那么就可以考慮一下Optitran或者Pall公司的以耐受力著稱的BioTrace NT Nitrocellulose Transfer Membrane。卷膜肯定是*的選擇，只不過要自己動(dòng)手裁剪——切記，必須帶手套操作。

PVDF膜
與硝酸纖維素膜相比，PVDF膜在蛋白質(zhì)截留能力，機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)相容性上都更*的性能。市售硝酸纖維素膜的典型結(jié)合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜結(jié)合量是100-200μg/cm2（而結(jié)合強(qiáng)度PVDF比硝纖膜強(qiáng)6倍?。?。但是PVDF膜zui大的優(yōu)點(diǎn)不僅于此：更好的機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)耐受性使PVDF膜在各種染色應(yīng)用和多重免疫檢測中成為理想選擇；而且單個(gè)凝膠的泳道復(fù)本可用于多種目的，特別是需要做N端蛋白測序，在相當(dāng)“嚴(yán)酷”的清洗條件下，當(dāng)尼龍或者硝纖膜已經(jīng)降解的情況下PVDF膜依然保持本色，笑傲江湖。所以PVDF也是要做蛋白測序的*選擇。但不適合熒光。PVDF膜特別注意的是需要100%甲醇預(yù)處理（不超過15秒）再用緩沖液平衡，才能用，而且適用過程中萬一干了也要同樣程序再處理（不過要真出現(xiàn)這種問題也是自己欠扁，誰要你不小心呢，轉(zhuǎn)膜前處理也就罷了，轉(zhuǎn)膜后再這樣處理可能會(huì)影響后繼的抗體識(shí)別呢）。PVDF膜同樣分0.45um和0.2um的，后者孔徑小，對小分子蛋白有較好的攔截吸附，背景可能會(huì)比前者稍高。
卷膜經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，裁剪剩下的邊角料還可以用來做點(diǎn)雜交。再次強(qiáng)調(diào)的是，疏水PVDF膜在用前必須經(jīng)過50%或以上體積比的甲醇或者乙醇溶液處理幾分鐘，待膜變成半透明后用純水漂洗一下，轉(zhuǎn)入電泳緩沖液平衡才能用。

環(huán)保在線 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.kytsldc.cn,All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，環(huán)保在線對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

會(huì)員登錄

×

請輸入賬號(hào)

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

請 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功！我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
色橹橹欧美在线观看视频高清免费| 大黑屌后入骚妇屁股| 草草久性色av综合av| 无码人妻精品一区二区三区蜜桃| 欧美日韩久久久一区二区三区| 一级特一黄大片欧美久久| 欧美日韩一区二区成人在线| 欧美 亚洲 日本 国产| 欧美一区二区三区色婷婷月色| 亚洲精品成a人在线观看| 亚洲av一区二区在线看| 国产伦精品一区二区三区视频抖音| 日韩欧美一区二区三区在线视频| 日本中文字幕无人区一区二区| 日逼动态视频免费看| 久久综合久久久久综合大| 使劲操大骚逼av| 成人毛片一级特黄| 好想插进去捅一捅| 高颜值美女视频在线观看| 麻豆91精品96久久久| 免费骚逼潮吹av| 亚洲男人的天堂2021| 国产精品自在拍首页| 99热这里只有精品98| 毛片日产av一区二区三区四区| aaa无码偷拍亚洲| 国产免费无码一区二区视频无码| 99视频在线看免费视频| 美女被插进去黄色| 国产天美传媒剧免费观看| 免费国产香蕉视频在线观看| 免费女人男人肏逼| 国产精品久久一区二区三区夜色| 中文字幕在线观一区二区| 欧美久久精品免费看C片| 欧美高清在线观看一区二区三区| 中文字幕在线精品的视频| 国产精品一区二区三区色噜噜| 国产乱色国产精品免费播放| 永久性日韩无码视频|