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――070040大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒(12種×10次)一)整套試劑及用品鑒定生化反應(yīng)的12種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5McFarland的濁度管、10支一次性吸管
―― 070040大腸埃希氏菌O157:H7生化鑒定盒(12種×10次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的12種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)出血性大腸桿菌O157:H7生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
出血性大腸桿菌O157:H7為革蘭氏陰性桿菌,需氧或兼性厭氧,有周鞭毛,并有菌毛,不產(chǎn)生芽孢的桿菌。發(fā)酵乳糖,不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵;氧化酶陰性;MUG陰性。
從可疑肉湯培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接營(yíng)養(yǎng)瓊脂分離培養(yǎng),將疑是腸桿菌科的新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ), 37℃培養(yǎng)18-24h,用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見表1。注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)方式,請(qǐng)?jiān)斠娒糠N生化鑒定管附帶的使用說明。
凡符合上述大腸桿菌O157:H7生化反應(yīng)的純菌落,經(jīng)用抗E.coli O157:H7標(biāo)準(zhǔn)血清或EHEC O157:H7乳膠凝集試劑測(cè)試呈陽性結(jié)果,即可報(bào)告為該食品試樣中檢出腸出血性大腸桿菌O157:H7。
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