小鼠elisa試劑盒標準曲線的繪制方法
一般來說作直線回歸的話，每次檢測的R2達到0.98，即R達到0.99，否則需要復測。
如果需要做幾次檢側，那么每次的斜率和截距相差不要超過百分之20，R是相關系數(shù)，x與y的相關性。一般用R2表示，更加。R2不是說是獨立的，其值越接近1說明其相關性越大。但是，一般的 R2不能達到這個值，0.95也不一定說明其相關性低，還應該檢測相關顯著差異性，無顯著差異則說明R是可信的。當然了，R2也是可信的。
什么是競爭性ELISA
競爭ELISA基于競爭結合技術，即樣本中的待測分子與固定量的標記的同樣分子（我們一般用堿性磷酸酶作為標記）同時與固定在孔板上的抗體的同一結合位點進行競爭，參照標準曲線，試驗數(shù)據(jù)值是定量的。
什么是夾心ELISA
夾層ELISA采用對樣本中分析物的特異的抗體作為固定化的捕獲抗體，然后用第二個帶標記的抗體作檢測，檢測抗體對分析物也是專一的。當參照標準曲線時，試驗數(shù)據(jù)值是定量的。
一個微孔板上可做多少個樣本
這是基于96孔微孔板的測試。除去陽性對照、陰性對照、本底（空白）和檢測抗體對照外，還剩下88孔，可做44個樣本（每個樣本做雙份）。
ELISA的標準曲線一般使用專門的曲線擬合工具，如：Curve Expert 1.3
下面以“Curve Exert1.3”軟件為例，繪制ELISA標準曲線的方法如下
1 啟動“Curve Expert1.3”
2．X軸輸入所對應的濃度值，Y軸輸入標準品的OD值，如圖：
3．單擊[運行] 按鈕，出現(xiàn)如下對話框
4．單擊[ok]按鈕，出現(xiàn)如下兩個對話框，關閉下面一個對話框
5. 在對話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱，從“1”開始依次點擊曲線名稱，在右下角會出現(xiàn)相應擬合的曲線。
6. 根據(jù)擬合的曲線選取ELISA擬合度*的曲線雙擊，出現(xiàn)如下對話框：
注意：選擇系數(shù)（即“r”值）的曲線方程來進行運算。在下面的對話框
右上角有“r”值 ，當“r”值越接近1擬合度越好
7．按[Ctrl]鍵+[L]鍵，出現(xiàn)如下對話框：
8．輸入標準的OD值，單擊[Calculate]按紐，即可得到待測蛋白的實際含量。（標本稀釋了N倍，運算出的數(shù)值應再成以N）。
9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程，可在步驟6的對話框空白處右擊，選擇”Information”
10. 得到如下對話框：點擊“Copy”
在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù)：
