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技術(shù)文章

*說(shuō)明書(shū)

閱讀:1229發(fā)布時(shí)間:2011-2-28

                    *說(shuō)明書(shū) 

                                                             50T

一、原理:
在酸性溶液和還原劑的作用下,使運(yùn)鐵蛋白中鐵與蛋白分離,使血清中的高鐵還原成亞鐵,后者與雙吡啶結(jié)合成粉紅色的絡(luò)合物,在一定范圍內(nèi),鐵離子的多少與色澤成正比。
二、試劑的組成與配制
1、100mg/L鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備液:1ml 溶液一瓶,4℃保存3個(gè)月。
   2mg/L鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液的配制:取鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備液0.2ml加蒸餾水定溶至10ml, 4保存。
2、鐵顯色劑:2號(hào)甲粉劑一支,2號(hào)乙粉劑一支,二號(hào)丙液100ml×1瓶,4℃保存6個(gè)月。
用時(shí)將甲、乙二粉劑倒入丙液中,充分混勻,溶解,即為鐵顯色劑,4℃避光保存。
三、操作表:

 
空白管O
標(biāo)準(zhǔn)管S
測(cè)定管U
蒸餾水(ml)
0.5
 
 
2mg/L鐵標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(ml)
 
0.5
 
血清 (ml)
 
 
0.5
鐵顯色劑(ml)
1.5
1.5
1.5

混勻后,沸水浴5分鐘,(空白及標(biāo)準(zhǔn)管可以不煮),冷卻后離心,3500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清液1.0ml,0.5cm光徑,波長(zhǎng)520nm,雙蒸水調(diào)零,測(cè)各管吸光度OD值。
四、計(jì)算與舉例:
1、 計(jì)算公式:
血清鐵(mg/L)=×標(biāo)準(zhǔn)濃度(2mg/L)
血清鐵(umol/L)=×標(biāo)準(zhǔn)濃度(35.81umol/L)
*標(biāo)準(zhǔn)管鐵含量為2000ug/L,鐵原子量為55.847,所以標(biāo)準(zhǔn)管鐵含量為35.81umol/L
2、舉例:
   取血漿0.5ml按操作表進(jìn)行血清(漿)鐵測(cè)定,在520nm處,0.5cm光徑,測(cè)定各管吸光度為:空白管0.000,標(biāo)準(zhǔn)管0.038,測(cè)定管0.037,則計(jì)算如下:
   血清鐵(umol/L)=×標(biāo)準(zhǔn)液濃度=×35.81=34.87(umol/L)

五、注意點(diǎn):
1、 玻璃器材需嚴(yán)格清洗,避免鐵的污染,建議用一次性塑料試管。
2、 若上清渾濁,可再用另一試管再次離心后比色。
上海恒遠(yuǎn)生物公司專(zhuān)業(yè)經(jīng)銷(xiāo)眾多生命科學(xué)領(lǐng)域的ELISA試劑盒,生物試劑,抗體,培養(yǎng)基,血清。為中國(guó)科研試劑供應(yīng)商之一,質(zhì)量被全國(guó)各大院??蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可,并為Elisa試劑盒長(zhǎng)期供應(yīng)商,作為戰(zhàn)略合作伙伴。歡迎您。

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