大鼠elisa試劑盒的操作要點(diǎn)
大鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)因多重優(yōu)勢(shì)在免疫學(xué)查驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用,急速展開(kāi)。那么大鼠elisa試劑盒所具有的高特異性優(yōu)勢(shì)有哪些呢?
1. 特異性:指大鼠elisa試劑盒正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的才干(無(wú)假陽(yáng)性),取決于包被抗原(體)及符號(hào)抗原(體)的純度及特異性。
2. 安穩(wěn)性:大鼠elisa試劑盒在規(guī)則條件下能儲(chǔ)存的時(shí)間,一般選用破壞性實(shí)驗(yàn)行將試劑存放于37℃保存,定時(shí)測(cè)定其靈敏度,特異性和精密度等方針,直到其質(zhì)量方針開(kāi)端下降中止,一般認(rèn)為37℃每安穩(wěn)一天相當(dāng)于4-10℃保存一個(gè)半月。
3. 簡(jiǎn)便性:大鼠elisa試劑盒指在不影響試劑的前三項(xiàng)方針的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定過(guò)程越少越好,在定性實(shí)驗(yàn)中成果判別簡(jiǎn)略明晰,定量實(shí)驗(yàn)成果核算也應(yīng)簡(jiǎn)略。 受方法學(xué)及技術(shù)條件的約束,在酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定中有時(shí)不可避免的會(huì)出現(xiàn)必定的非特異性,咱們可以通過(guò)以上辦法把非特異性顯色降至zui低限底,然后前進(jìn)檢測(cè)的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)成果。
大鼠elisa試劑盒的操作要點(diǎn):
大鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測(cè)定模式,大鼠elisa試劑盒測(cè)定操作非常簡(jiǎn)單,一般涉及到標(biāo)本的收集保存、試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報(bào)告及解釋等方面,其中任一步驟的不當(dāng)都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。大鼠elisa試劑盒正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁加入,應(yīng)注意角度太小,會(huì)使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確;吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處!
凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。
血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在大鼠elisa試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的大鼠elisa試劑盒測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。