（一）污染問題
污染問題是組織培養(yǎng)過程中常見的而且也必須給予高度重視的一個問題。污染率達(dá)20％很常見，有時甚至高達(dá)50％。經(jīng)分析，組織中的污染來源可分成三大類：*類是材料帶菌，第二類是接種污染，第三類是培養(yǎng)過程感染。材料帶菌就是選用的外植體因過大等原因本身帶有病菌，或繼代培養(yǎng)的材料本身帶有病菌。針對這種情況，要求初代接種時使用大小適宜的外植體，在繼代的培養(yǎng)中，每次繼代之前都要對繼代的材料進(jìn)行仔細(xì)檢查，凡是污染的材料應(yīng)予以丟棄。接種污染是由于在接種過程中將病菌傳入培養(yǎng)材料而造成的。引起接種污染可能有三個原因：*是由于超凈工作臺濾出的空氣中帶菌超標(biāo)造成的，屬于這種情況要及時修理或更換超凈工作臺；第二是由于交叉污染造成的，針對這種情況，要求接種者操作細(xì)心，接種用的鑷子不要與酒精燈、臺面等接觸，一旦接觸應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理，同時各瓶材料接完時要對鑷子進(jìn)行消毒；第三種是由接種者呼吸等原因造成的，針對這一點(diǎn)，要求接種者在接種時應(yīng)用酒精棉擦手，穿上無菌的白大衣，帶上口罩和帽子。
在材料培養(yǎng)的過程中，如果環(huán)境中病菌多、濕度大、溫度高，同樣會使培養(yǎng)的材料污染。這就要求我們要經(jīng)常進(jìn)行清潔衛(wèi)生，對培養(yǎng)空間定期進(jìn)行消毒處理，及時清除污染材料，轉(zhuǎn)移繼代材料。
有時候高壓滅菌不*，會造成嚴(yán)重污染，這點(diǎn)也很關(guān)鍵。
（二）褐變問題
組織培養(yǎng)中的一大問題是初代培養(yǎng)中外植體易于褐變。從我們的經(jīng)驗(yàn)和別人研究結(jié)果看可采取以下方法：①初代培養(yǎng)時，剝?nèi)〗M織塊能夠在無菌水中進(jìn)行；②初代培養(yǎng)采用液體培養(yǎng)比用固體培養(yǎng)效果好；③在培養(yǎng)基中單獨(dú)或復(fù)合使用防褐變物質(zhì)：蕓香苷50-100毫克/升、20%*溶液5毫升/升、檸檬酸0.05-0.5%、活性炭1-4克/升、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）5-10克/升；④從開始培養(yǎng)到成活的一段時間內(nèi)保持?jǐn)z氏溫度17-20度；⑤調(diào)整好培養(yǎng)基的酸堿度，以酸堿度為5.5時成活率高；⑥6-8月份高溫季節(jié)，外植體易褐變，成活率低；⑦從新生的假球莖上取芽，不僅能夠減少污染，而且成活率高。
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