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陰離子去垢劑SDS

時間:2011/4/13閱讀:4822
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陰離子去垢劑SDS

SDS(十二烷基硫酸鈉)是陰離子去垢劑,本身帶負(fù)電荷的SDS能夠與蛋白質(zhì)的疏水區(qū)相結(jié)合,使蛋白質(zhì)伸展和解聚,并使蛋白質(zhì)呈一致的強負(fù)電荷,從而消除了不同蛋白質(zhì)分子之間的電荷差異。在收集細(xì)胞蛋白的操作中,它主要作用有二:1、能改變細(xì)胞的表面張力而使細(xì)胞膜破裂,效果很強很迅速;2、可以使蛋白質(zhì)變性而使其與DNA分離,在收蛋白zui后一步操作中離心下來的就是基因組DNA,上清液中即使有點RNA也會很快降解。在1XSDS蛋白裂解液中,SDS的終濃度為2%,即每50ml裂解液中含有1gSDS。 SDS的應(yīng)用廣泛,蛋白質(zhì)收集、Western Blot里上樣乃至SDS-PAGE凝膠電泳過程中都會應(yīng)用到。然而SDS是離子型去垢劑會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性,所以對于要檢測蛋白質(zhì)間相互作用的免疫沉淀(IP)之類的實驗就不能使用了。

SDS是離子型表面活性劑。
它主要功能有:
(1)溶解細(xì)胞膜上的脂質(zhì)與蛋白,因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜。
(2)解聚細(xì)胞中的核蛋白。
(3)SDS能與蛋 白質(zhì)結(jié)合成為R-O-SO3…R┿-蛋白質(zhì)的復(fù)合物,使蛋白質(zhì)變性而沉淀下來。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取過程中,必須把它去除 干凈,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA時)受到干擾

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