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科研抗體
PCR試劑盒
科研細(xì)胞
細(xì)胞生物學(xué)試劑

膠原酶的使用說明書

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1.將漂洗、修剪干凈的*成1~2mm3左右小塊   
2.將組織塊放入離心管(三角燒瓶)中加入30~50倍體積的*,旋緊蓋子(密封燒瓶)。   
3.將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內(nèi),每隔3min振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。消化時間與組織的類別很有關(guān)系,對于某些腫瘤組織或其他較致密結(jié)締組織,消化時間4~48h,對于容易消化的組織可以采用37℃震蕩消化15~45min,也可以根據(jù)具體情況而定。如組織塊已分散而失去塊的形狀,一經(jīng)搖動即成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞,可以認(rèn)為已消化充分。上皮組織經(jīng)膠原酶消化后,由于上皮細(xì)胞對此酶有耐受性,可能仍有一些細(xì)胞團(tuán)未*分散,但分散的單個上皮細(xì)胞沒有成團(tuán)的上皮細(xì)胞更易生長,因此,如無特殊需要可以不必再進(jìn)一步處理。   
4.收集消化液(有時含個別組織塊及沒有充分消化的組織碎屑則需用100目不銹鋼網(wǎng)過濾),離心1000r/min,5min,去除上清,用Hanks液或者無血清培養(yǎng)液離心漂洗1~2次,去除上清,加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)瓶。

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