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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>生化測(cè)試劑盒>> 乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒(LD-L微板法)
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更新時(shí)間:2024-09-04 12:39:59瀏覽次數(shù):481次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線貨號(hào) | CS-C8621 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 100T | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
注意事項(xiàng):
乳酸氧化成丙酮酸,同時(shí)NAD+氧化成NADH,引起340nm處吸光度的升高。其升高速率與標(biāo)本中LDH活性呈正比關(guān)系,通過酶標(biāo)儀或自動(dòng)分析儀檢測(cè)340nm處吸光度升高速率,通過計(jì)算獲得乳酸脫氫酶的活性。該LD-L法的優(yōu)點(diǎn)是:1、乳酸鹽和NAD+底物溶液的穩(wěn)定性比LD-P法中的丙酮酸和NADH底物溶液好;2、線性速率反應(yīng)時(shí)間范圍較寬;3、重復(fù)性比LD-P法和二硝基苯肼法好;4、準(zhǔn)確性比二硝基苯肼法好
商品屬性:
貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C8621 | 100T | 1~3天 |
步驟和注意事項(xiàng):?
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境:?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細(xì)胞培養(yǎng):?
準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?
取出保存于低溫下的細(xì)胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇:?
細(xì)胞系的凍存是將生長(zhǎng)較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程,?原則是“慢凍快融",?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?
細(xì)胞計(jì)數(shù):?
制備細(xì)胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù),?細(xì)胞壓中線時(shí),?只計(jì)左側(cè)和上方者,?不計(jì)右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào),?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)(?PCR)?:?
準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液,?開始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否,?可以通過電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?
轉(zhuǎn)染:?
準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑,?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中,?與細(xì)胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞,?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?
在操作過程中,?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時(shí)登記購(gòu)買耗材或試劑,?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全
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