RIPA裂解緩沖液(Western Blot)免疫檢測

商品屬性：

商品介紹：

對目的蛋白進行檢測分析時，總蛋白的提取至關(guān)重要，如蛋白提取不好會導(dǎo)致后續(xù)試驗的不理想甚至失敗，如：信號極弱或無雜交信號、背景高、非特異性條帶多等.根據(jù)目標(biāo)蛋白的類型和實驗應(yīng)用種類來選擇合適的RIPA裂解液，才能大程度地保證后續(xù)實驗的成功。而RIPA Lysis Buffer For Western Blot對動物組織和細胞的裂解能力，它可以裂解細胞核和線粒體，并可提取到更多的膜蛋白，從而可獲得更多的總蛋白。因其強的裂解能力，使得大量的基因組DNA從細胞核中釋放出來，使蛋白變的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶(貨號：MT0068)消化可有效解決。經(jīng)我司RIPA裂解液獲得得蛋白可用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度；使用Bradford法測定由本裂解液裂解所得到樣品的蛋白濃度會稍有誤差。

RIPA裂解緩沖液(Western Blot)

產(chǎn)品特點：

1．可以很好的裂解細胞膜及細胞核，從而更好的釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白。

2．對于核蛋白，經(jīng)本品裂解后，核蛋白與粘稠的基因組DNA分離，離心后核蛋白存在于上清中，核蛋白的捕獲率高達90%。

3．對于膜蛋白，Western Blot RIPA Lysis Buffer可大程度的破壞細胞膜和變性蛋白，使蛋白與膜分離，防止蛋白與膜復(fù)合物在離心后沉淀，從而防止蛋白丟失。

4．在提取蛋白過程中，基因組DNA釋放使得蛋白提取液變的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解決。

儲存條件：置于室溫陰涼處，可保存2年。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復(fù)蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：