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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>免疫檢測>> Protein A免疫沉淀磁珠試劑盒
貨號 | CS-C8897 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 20次/100次 | 英文名稱 | Protein A Immunoprecipitation Kit |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
Protein A免疫沉淀磁珠試劑盒Protein A/G Matrix免疫沉淀磁珠及試劑盒系列產(chǎn)品是利用納米表面技術(shù)使Protein A/G高密度定向包被到超順磁性微球表面,與當(dāng)前國際免疫磁珠市場上同類產(chǎn)品相比,該產(chǎn)品具有更多的抗體結(jié)合位點,磁珠使用量更少,非特異性結(jié)合率低,可便捷高效地進(jìn)行免疫沉淀實驗。每毫升免疫沉淀磁珠結(jié)合Human IgG的能力可達(dá)到300μg以上,單個沉淀反應(yīng)僅需25μL磁珠即可完成檢測。微米級磁珠提供的超大比表面積,大幅縮短抗體與抗原吸附所需的平衡時間,15 min內(nèi)即可完成抗體吸附過程,30 min內(nèi)完成抗原沉淀操作。簡短的操作時間避免長時間操作造成目標(biāo)蛋白水解,保證了目標(biāo)蛋白的活性及蛋白復(fù)合物的完整性。
免疫沉淀磁珠試劑盒配有經(jīng)過優(yōu)化預(yù)制的緩沖液,為免疫沉淀實驗提供了佳的反應(yīng)條件,增強(qiáng)了免疫沉淀實驗的穩(wěn)定性。
本產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于細(xì)胞裂解物、細(xì)胞分泌上清、血清、腹水等樣品中抗原的免疫沉淀反應(yīng)。操作者可以參考本操作說明書,附表1的數(shù)據(jù)了解不同種屬來源及亞型的抗體與Protein A磁珠、Protein A/G的結(jié)合能力。
儲存條件:2~8℃保存
保存期:1年
注:磁珠結(jié)合Human IgG能力(Antibody Capacity)分別為:Protein A:0.4~0.5 mg/mL; Protein A/G:0.5~0.6 mg/mL
操作流程:
1. 抗原樣品制備:本操作說明書提供以下四種樣品處理方法,建議您根據(jù)不同來源的抗原樣品選擇適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行預(yù)處理,使待檢測抗原釋放至樣品溶液中。
血清樣品處理:若目標(biāo)蛋白豐度較高,建議用結(jié)合緩沖液(②)稀釋血清樣品至目標(biāo)蛋白終濃度為10~100 μg/mL,置于冰上備用(或置于-20℃長期保存)。
懸浮細(xì)胞樣品處理:離心收集細(xì)胞(4℃,500 g,10 min),棄上清后稱重,按每毫克細(xì)胞50 μL的比例用1× PBS(③)洗滌2次;按每毫克細(xì)胞5~10 μL的比例加入結(jié)合緩沖液(②),同時加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為1 mM 的PMSF),混勻后置于冰上處理10 min;離心收集上清液(4℃,14000 g,10 min),置于冰上備用(或置于-20℃長期保存)。
貼壁細(xì)胞樣品處理:移去培養(yǎng)基,按每1.0×105個細(xì)胞150 μL的比例用1×PBS(③)洗滌兩次;用細(xì)胞刮棒刮脫細(xì)胞,收集至1.5 mL EP管內(nèi),按每1.0×105個細(xì)胞20~30 μL 的比例加入結(jié)合緩沖液(②),同時加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為1 mM的PMSF),混勻后置于冰上處理10 min;離心收集上清液(4℃,14000 g,10 min),置于冰上備用(或置于-20℃長期保存)。
大腸桿菌樣品處理:離心收集大腸桿菌(4℃,12000 g,2 min),棄上清后稱重,按每克(濕重)菌體 10 mL的比例用1×PBS(③)洗滌2次;按每克(濕重)菌體5~10 mL的比例加入結(jié)合緩沖液(②),同時加入蛋白酶抑制劑(如終濃度為1 mM 的PMSF),重懸菌體,超聲裂解細(xì)胞,離心收集上清(4℃,17000 g,10 min)。
2. 磁珠預(yù)處理:將免疫沉淀磁珠(①)漩渦振蕩1 min,使磁珠充分振蕩重懸;取25~50 μL磁珠懸液置 于1.5 mL EP管中。加入200 μL 結(jié)合緩沖液(②)洗滌,進(jìn)行磁性分離[將EP管放置于磁性分離器(⑦)上,使磁珠被吸附在管壁至溶液澄清;該操作描述以下省略],棄上清液,從磁性分離器上取下EP管,重復(fù)洗滌一次。后加入200 μL 結(jié)合緩沖液(②)重懸磁珠以備用。
產(chǎn)品名稱 | Protein A免疫沉淀磁珠試劑盒 | 貨號 | CS-C8897 |
英文名稱 | Protein A Immunoprecipitation Kit | 規(guī)格 | 20次/100次 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些:
1.顯微技術(shù):包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù):離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程:細(xì)胞培養(yǎng)。
注意事項:
1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶,反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試本試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無顯著影響,為取得良好的使用效果,*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中,可能會導(dǎo)致檢測試劑中出現(xiàn)少量沉淀,此時宜平衡至室溫,并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物,可以離心去除后使用,經(jīng)測試不會影響后續(xù)的檢測效果。
2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相鄰孔之間會產(chǎn)生相互干擾。
3. 使用說明中提供了檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法,實際檢測細(xì)胞活力時通常并不需要檢測ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
公司正在出售的產(chǎn)品:
FXR和TGR5激動劑(INT-767) | 血管緊張su1-9ELISA試劑盒 |
谷氨轉(zhuǎn)移酶抑制劑(Azaserine) | CD7分子ELISA試劑盒 |
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表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑(Avitinib maleate) | 足馬杜拉分枝菌PCR檢測試劑盒 |
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