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當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>免疫檢測>> Alexa Fluor 488抗兔免疫熒光染色試劑盒
貨號 | CS-C8721 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | >300次 | 英文名稱 | Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 48 |
用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C8721 | >300次 | 1~3天 | Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 488-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG |
商品介紹:
本試劑盒含有Alexa Fluor 488標記的山羊抗兔IgG(H+L)抗體,可以用于檢測兔來源的相應(yīng)一抗,觀察到的顏色為非常鮮艷的綠色。Alexa Fluor 488是一種常用的非常明亮的綠色熒光探針。它比絕大部分常用的綠色熒光探針更加明亮,更加不容易淬滅,而且背景更低。Alexa Fluor 488的熒光光譜與FITC和Cy2比較接近。Alexa Fluor 488的吸收峰495nm、發(fā)射峰519nm。本試劑盒提供了含有熒光標記抗體穩(wěn)定劑的免疫熒光染色二抗稀釋液,可以確保熒光標記抗體稀釋后在4℃可以保存長達6個月,并且在6個月內(nèi)至少可以重復(fù)使用10次。本試劑盒含有抗熒光淬滅封片液,可以使熒光更加持久。本試劑盒對于六孔板內(nèi)的細胞樣品或常規(guī)切片,至少可以檢測300個樣品。
試劑盒組份:
抗兔Alexa Fluor 488———————30μl
免疫熒光染色二抗稀釋液—————50ml
抗熒光淬滅封片液————————15ml
注意事項:
1. 需熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
2. 在使用抗熒光淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅,但仍宜盡量避光,特別是需要盡量縮短在熒光顯微鏡下的觀察時間。
3. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,染色后宜盡快進行熒光顯微鏡下的觀察。如果不能及時觀察可以4℃避光保存,但存放時間通常不宜超過一周,隨著存放時間的延長可能會導(dǎo)致觀察效果越來越差。
4. 免疫熒光染色效果的好壞和一抗的關(guān)系非常密切。建議選購有較多文獻報道的并注明可以用于免疫熒光染色的一抗用于本實驗。
5. 如果觀察時發(fā)現(xiàn)熒光過弱,可以適當提高一抗的濃度;如果熒光還是比較弱,可以適當提高熒光標記抗體的濃度。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
步驟和注意事項:?
準備實驗環(huán)境:?確保實驗區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細胞培養(yǎng):?
準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?
取出保存于低溫下的細胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細胞凍存與復(fù)蘇:?
細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對其長期保存的過程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程,?原則是“慢凍快融",?以較大限度地保存細胞活力。?
細胞計數(shù):?
制備細胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞,?制成單個細胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù),?細胞壓中線時,?只計左側(cè)和上方者,?不計右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對細胞進行染色,?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號,?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)(?PCR)?:?
準備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液,?開始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否,?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?
轉(zhuǎn)染:?
準備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑,?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中,?與細胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細胞,?并進行下一步實驗。?
在操作過程中,?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時登記購買耗材或試劑,?保持實驗環(huán)境的清潔和安全
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
CDK/TRK抑制劑(PHA-848125) | 胰安肽ELISA試劑盒 |
果糖膠封片劑 | Bcl2拮抗/殺傷因子1ELISA試劑盒 |
支原體去除試劑(1000×) | 氧化(XOD)活性比色法檢測試劑盒 |
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