注意事項(xiàng)：

1. 本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過程中，可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時(shí)宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。

2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。

3. ECM Kit(大鼠IgG)免疫檢測(cè)使用說明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法，實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。

保存條件：4℃可保存一年 。

Western Blotting 檢測(cè)試劑盒內(nèi)容：

1.封閉試劑：10g 蛋白質(zhì)干粉(脫脂奶粉)。

2.HRP 標(biāo)記兔抗大鼠IgG：0.1ml 親和純化抗體，經(jīng)過人血清吸附以去除交叉抗體。效價(jià) 1：2000-10000。

3.ECM 顯色劑：總量 100ml。含 A 液 5ml(×20倍)；B 液 5ml(×20倍)。每個(gè)試劑盒足夠 10 張小膜或800 c㎡面積的膜顯色

工作原理：

蛋白質(zhì)的電泳分離是重要的生物化學(xué)分離純化技術(shù)之一,電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)作用下 ,向著與其電荷相反的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。根據(jù)所采用的支持物不同,可分為：瓊脂糖凝膠電泳、淀粉凝膠電泳、聚丙烯凝膠電泳等。其中以聚丙烯凝膠電泳(PAGE)廣泛。它的優(yōu)點(diǎn)為：無電滲作用,樣品用量少(1-100μg),分辨率高,可檢出 10-9-10-12mol的樣品,凝膠機(jī)械強(qiáng)度大,重復(fù)性好以及可以通過調(diào)節(jié)單體濃度或單體與交聯(lián)劑的比例而得到孔徑不同的凝膠。SDS-PAGE 是的定性分析蛋白質(zhì)的電泳方式,它根據(jù)蛋白分子大小不同，遷移速率的不同而達(dá)到分離目的，特別是用于蛋白質(zhì)純度檢測(cè)和測(cè)定蛋白質(zhì)分子量。

免疫印跡是將凝膠電泳的高分辨力和免疫化學(xué)檢測(cè)的特異性融為一體。免疫印跡技術(shù)首先借助凝膠電泳將蛋白質(zhì)抗原分離，然后將凝膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印到膜上使之成為被分離的一個(gè)拷貝。免疫印跡為檢測(cè)樣品中是否存在目的蛋白提供一種可靠的方法，該法鑒定蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)被測(cè)蛋白能與特異性抗體結(jié)合的特性并通過相對(duì)遷移率來體現(xiàn)該蛋白的分子量。如果想要了解樣品中是否存在某一抗原，以及該抗原的含量或該抗原多肽鏈的相對(duì)分子質(zhì)量以及亞型，是否與其他蛋白結(jié)合，蛋白質(zhì)的酪殘基是否發(fā)生磷酸化等有關(guān)問題均可采用免疫印跡。

免疫印跡包括多個(gè)簡(jiǎn)單步驟，可在一到兩天完成，該方法具有高效，簡(jiǎn)便，靈敏等特點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：

1．蛋白質(zhì)的樣品制備：

1)細(xì)胞培養(yǎng)蛋白質(zhì)樣品的制備：

1：消化后裂解：細(xì)胞培養(yǎng)至 80%左右密度時(shí)，以含 0.25%yi蛋白酶消化,室溫，低速離心，棄上清。細(xì)胞經(jīng)預(yù)冷的PBS 漂洗3次，加入 0.1-1ml 裂解液(根據(jù)細(xì)胞數(shù)量定)反復(fù)吹打。

用途：適于一抗為大鼠IgG的Western Blotting 檢測(cè)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些：

1.顯微技術(shù)：包括顯微觀察,顯微操作.

2細(xì)胞組分分析技術(shù)：離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程：細(xì)胞培養(yǎng)。