MDA-MB-231 (人乳腺癌細(xì)胞)

別稱 MDA-MB 231; MDA.MB.231; MDA MB 231; MDA MB231; MDA Mb231; MDA-MB231; MDAMB-231; MDAMB231; MDA-231; MDA231; MB231; MD Anderson-Metastatic Breast-231

種屬 人類

年齡（性別） 女性，51歲

組織來源 乳腺腺癌，轉(zhuǎn)移性胸膜滲出液

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 MDA-MB-231來自患有轉(zhuǎn)移乳腺腺癌的51歲女病人的胸水。 在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中，它能形成低分化腺癌（III級(jí)）。細(xì)胞表達(dá)WNT7B癌基因。

生物安全等級(jí) 1

生長培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~32-42小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in ALS treated BALB/c mice, forms poorly differentiated adenocarcinoma (grade III).Yes, in nude mice, forms poorly differentiated adenocarcinoma (grade III).

受體表達(dá)情況 epidermal growth factor (EGF), expressed;transforming growth factor alpha (TGF alpha), expressed

注意事項(xiàng) 1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性； 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培養(yǎng)基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳； 2、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，請(qǐng)聯(lián)系銷售下單備注更改。

細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)70%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。該細(xì)胞為懸浮和輕微的貼壁細(xì)胞，傳代可以參考以下方法：

1、收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細(xì)胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。由于細(xì)胞貼壁不牢PBS潤洗后細(xì)胞會(huì)脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2、加入0.25％（w / v）0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3、將收集到的懸浮細(xì)胞、pbs清洗液中的細(xì)胞和消化下來的貼壁細(xì)胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例：

1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.

2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

操作步驟：

步驟1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

步驟2：離心收集對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時(shí)間3min）

步驟3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細(xì)胞

步驟4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記

步驟5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

在沒有凍存盒或者非程序凍存液時(shí)，可以選擇手動(dòng)梯度降溫。但手動(dòng)梯度降溫不適用于所有細(xì)胞，且效果不穩(wěn)定，同樣需要先做凍存測(cè)試。

注意事項(xiàng)：

1、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2、收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3、由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。

4、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
公司正在出售的產(chǎn)品：

SCaBER (人膀胱鱗癌細(xì)胞)

TF-1 (人血液白血病細(xì)胞)

TG-905 (人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

THP-1 (人單核細(xì)胞白血病)

TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)

TM4 (正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞)

TOV-112D (人上皮性卵巢癌細(xì)胞)

TPC-1 (人甲狀腺癌細(xì)胞)

TSCCa (人舌鱗癌細(xì)胞)

TT (人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞)

TTA1(人甲狀腺癌細(xì)胞)

TtT/GF (小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細(xì)胞)

U-118 MG (人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)

U14 (小鼠子宮頸癌細(xì)胞)

U-2 OS [U2OS] (人骨肉瘤細(xì)胞)

雞白介su1(IL-1)檢測(cè)試劑盒

人γ干擾su(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒

人轉(zhuǎn)化生長因子-β誘導(dǎo)蛋白IG-H3(TGFBI/BIGH3)檢測(cè)試劑盒

大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)檢測(cè)試劑盒

結(jié)腸彎曲桿菌PCR試劑盒

大擬片形吸蟲PCR試劑盒

牛病毒性腹瀉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒

牛腺病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒

變形桿菌屬通用PCR試劑盒

中間葡萄球菌PCR試劑盒

豬弓形蟲PCR檢測(cè)試劑盒

MDA-MB-231 (人乳腺癌細(xì)胞)比氏腸微孢蟲PCR試劑盒

本迪布焦型埃博拉病毒PCR檢測(cè)試劑盒

豬巨細(xì)胞病毒PCR試劑盒

犬皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒