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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	腦組織
貨號	CS-X3042	細胞形態(tài)	神經(jīng)元細胞樣

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3042	組織來源	腦組織
傳代特性	屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群	培養(yǎng)基	含B-27、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	神經(jīng)元細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：小鼠小腦顆粒細胞
2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織；神經(jīng)元是神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結構與功能單位，小腦顆粒神經(jīng)元是體積較小的神經(jīng)元，直徑約10μm，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中含量非常豐富，近乎神經(jīng)元數(shù)量的一半。由于小腦神經(jīng)元的生長、分化和大腦皮層神經(jīng)元相似，而且數(shù)量多、便于取材，因此小腦顆粒神經(jīng)元是研究神經(jīng)元生長發(fā)育、神經(jīng)軸突再生及神經(jīng)疾病發(fā)生機制和臨床神經(jīng)藥理的重要手段。小腦顆粒神經(jīng)元是小腦主要的中間神經(jīng)元，在哺乳動物的小腦內(nèi)數(shù)量最為豐富。顆粒神經(jīng)元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯(lián)系，形成小腦皮層內(nèi)的神經(jīng)元環(huán)路，在小腦的神經(jīng)活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中，病變可波及小腦顆粒神經(jīng)元，導致小腦皮層的神經(jīng)元環(huán)路受損，從而呈現(xiàn)神經(jīng)性行為失調。研究小腦顆粒神經(jīng)元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發(fā)生的機理特別是分子機理，有賴于小腦顆粒神經(jīng)元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導，這是小腦功能理論中的關鍵假設，小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠小腦顆粒細胞采用yi蛋白酶消化法結合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠小腦顆粒細胞經(jīng)NSE免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣

傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠小腦顆粒細胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠骨髓間充質干細胞	人抗G2s抗體(IgG)ELISA檢測試劑盒
人結腸黏膜上皮細胞	人5脂加氧mei(5-LO/LOX)檢測試劑盒
人卵巢顆粒細胞	人黑色su檢測試劑盒
人腦靜脈血管內(nèi)皮細胞	人CD63分子(CD63)ELISA檢測試劑盒
人皮層神經(jīng)元細胞	腺熱埃里希體PCR試劑盒
人臍靜脈內(nèi)皮細胞	麻黃根染料法PCR鑒定試劑盒
人前列腺上皮細胞	流行性腦膜炎雙球菌PCR檢測試劑盒
人神經(jīng)小膠質細胞	豬乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒
人腎小球系膜細胞	卡他莫拉菌PCR試劑盒
人髓母細胞瘤組織源細胞	人免疫缺陷病毒II型RT-PCR試劑盒
人外周血淋巴細胞	人乳頭瘤病毒33PCR試劑盒
人牙齦成纖維細胞	口蹄疫病毒通用PCR檢測試劑盒
人小腦顆粒細胞	小鼠小腦顆粒細胞空腸彎曲桿菌PCR試劑盒
人真皮微血管內(nèi)皮細胞	人皰疹病毒型通用PCR檢測試劑盒
人椎間盤髓核細胞	腦膜炎病毒多重PCR檢測試劑盒