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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	骨髓
貨號	CS-X3242	細胞形態(tài)	巨噬細胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3242	組織來源	骨髓
傳代特性	屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	巨噬細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

人骨髓來源巨噬細胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：人骨髓來源巨噬細胞
2.組織來源：骨髓

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人骨髓來源巨噬細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人骨髓來源巨噬細胞采用分離骨髓單個核細胞經(jīng)細胞因子誘導分化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人骨髓來源巨噬細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液利duo卡因（12mM）

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

人骨髓來源巨噬細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠睪丸間質(zhì)細胞	人鈣激活中性蛋白mei6(CAPN6)ELISA檢測試劑盒
MOLT-4 (人急性淋巴母細胞白血病細胞)	人類似RIKENcDNA2010109K09基因檢測試劑盒
MRC-5 (人胚肺細胞)	人蛋白ATP1B4(ATP1B4)檢測試劑盒
MS1 (小鼠胰島內(nèi)皮細胞)	人Toll樣受體3(TLR3)試劑盒ELISA
MSTO-211H (人肺癌細胞株)	諾卡菌通用PCR試劑盒
NAMALWA (人Burkitt's淋巴瘤細胞)	狂犬病毒PCR檢測試劑盒
NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞)	豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒PCR檢測試劑盒
NCI-H1650 (人非小細胞肺癌細胞)	單增李斯特菌prfA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)
NCI-H292 (人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移))	馬巴貝斯蟲PCR試劑盒
Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] (小鼠腦神經(jīng)瘤細胞)	禽輪狀病毒A組RT-PCR試劑盒
NCI-N87 [N87] (人胃癌細胞)	病毒H7亞型PCR檢測試劑盒
NIH/3T3 (小鼠胚胎細胞)	馬紅球菌PCR試劑盒
NG108-15 [108CC15] (小鼠神經(jīng)細胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細胞)	人骨髓來源巨噬細胞麻風分枝桿菌PCR試劑盒
NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬細胞)	禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒
NRK (大鼠腎細胞)	禽傳染性法氏囊病毒(IBDV)核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。