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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	皮膚組織
貨號	CS-X3360	細胞形態(tài)	成纖維細胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3360	組織來源	皮膚組織
傳代特性	可傳3-5代左右	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	成纖維細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次；

人瘢痕疙瘩成纖維細胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：人瘢痕疙瘩成纖維細胞
2.組織來源：皮膚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人瘢痕疙瘩成纖維細胞分離自皮膚瘢痕疙瘩組織；瘢痕疙瘩，俗稱疤痕疙瘩，是皮膚傷口愈合或不明原因所致皮膚損傷愈合后所形成的過度生長的異常瘢痕組織，目前學術(shù)界認為各種原因?qū)е碌鸟：廴缇哂幸韵绿攸c，可診斷為瘢痕疙瘩：①病變超過原始皮膚損傷范圍；②呈持續(xù)性生長；③高起皮膚表面、質(zhì)硬韌、顏色發(fā)紅的結(jié)節(jié)狀、條索狀或片狀腫塊。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的瘢痕疙瘩成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纖維細胞同正常皮膚成纖維細胞在形態(tài)上沒有表現(xiàn)出明顯的差異。瘢痕疙瘩成纖維細胞生長同正常皮膚成纖維細胞的生長沒有明顯的差別。癜痕成纖維細胞對血清的依賴性低于正常皮膚成纖維細胞。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人瘢痕疙瘩成纖維細胞采用先中性dan白酶消化、后yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人瘢痕疙瘩成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次；

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性可傳3-5代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

人瘢痕疙瘩成纖維細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠髖臼軟骨細胞	人催乳su釋放激su(PRH)檢測試劑盒
NCI-H2347 (人肺癌細胞)	人D(VD)檢測試劑盒
NCI-H2452 [H2452] (人間皮瘤細胞)	人白介su28A(IL-28A/IFN-λ2)試劑盒ELISA
NCI-H292 (人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移))	人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA檢測試劑盒
NCI-H295R (人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞)	牛RT-PCR試劑盒
NCI-H358 (人非小細胞肺癌細胞)	鴨乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒
NCI-H441 (人肺腺癌細胞)	寨卡（zika）病毒核suan檢測試劑盒
NCI-H446 [H446] (人小細胞肺癌細胞)	輪狀病毒PCR檢測試劑盒
NCI-H520 (人肺鱗癌細胞)	貓源性成分PCR試劑盒
NCI-H524 (人小細胞肺癌細胞)	皮欽德病毒RT-PCR試劑盒
NCI-H596 (人肺腺鱗癌細胞)	歐洲棕色野兔綜合癥病毒PCR檢測試劑盒
NCI-H661 (人大細胞肺癌細胞)	美人魚發(fā)光桿菌PCR檢測試劑盒
NCI-H647 (人肺癌細胞)	人瘢痕疙瘩成纖維細胞貓源性成分PCR試劑盒
NCI-H69(人小細胞肺癌細胞)	諾卡菌PCR試劑盒
NCI-H716 [H716] (人結(jié)直腸腺癌細胞)	鴨源性成分Co基因(Duck-Co)檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。