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規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶	組織來源	胎盤組織
貨號	CS-X3280	細胞形態(tài)	成纖維細胞樣

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3280	組織來源	胎盤組織
傳代特性	可傳3代左右	培養(yǎng)基	含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞形態(tài)	成纖維細胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%	換液頻率	每2-3天換液一次

大鼠滋養(yǎng)層干細胞

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠滋養(yǎng)層干細胞
2.組織來源：胎盤組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠滋養(yǎng)層干細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿浴ＬケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤組織細胞的祖細胞，與胚胎著床和胎盤的形成密切相關(guān)。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關(guān)鍵時期，此時期滋養(yǎng)層細胞增殖速度快，滋養(yǎng)層干細胞自我更新和分化旺盛，與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調(diào)節(jié)的失常有密切關(guān)系。在哺乳動物胚胎發(fā)育過程中，胚胎細胞第一次分化形成內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)外胚層。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤細胞的前體細胞，在胎盤發(fā)育中有重要作用。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠滋養(yǎng)層干細胞采用囊胚組織貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠滋養(yǎng)層干細胞經(jīng)HLA-E（白細胞抗原）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞保存方法：

（一）細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；

8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

大鼠滋養(yǎng)層干細胞

注意事項：

1）、欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人淋巴血管內(nèi)皮細胞	人法尼醇X受體(FXR)試劑盒ELISA
兔骨髓間充質(zhì)干細胞	人蛋白Z(ProteinZ)試劑盒ELISA
雞腎小管上皮細胞	人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)ELISA檢測試劑盒
人氣管上皮細胞	人αL巖藻糖苷mei(AFU)檢測試劑盒
小鼠支氣管成纖維細胞	曲霉屬通用PCR試劑盒
大鼠支氣管成纖維細胞	艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
兔肺成纖維細胞	傳染性胸膜肺炎放線桿菌(APP)核suan檢測試劑盒
雞小腸黏膜上皮細胞	古典豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用
小鼠肺大靜脈平滑肌細胞	馬立克氏病病毒1型PCR試劑盒
雞氣管上皮細胞	禽傳染性支氣管炎病毒Ark型RT-PCR試劑盒
人小氣道上皮細胞	禽病毒性關(guān)節(jié)炎PCR檢測試劑盒
大鼠肺大動脈平滑肌細胞	馬皰疹病毒3型PCR試劑盒
小鼠肺大動脈平滑肌細胞	大鼠滋養(yǎng)層干細胞馬克洛菌PCR試劑盒
兔肺動脈成纖維細胞	禽白血病病毒PCR檢測試劑盒
雞骨骼肌細胞	貓瘟病毒(FPV)核suan檢測試劑盒

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養(yǎng)基，使細胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數(shù)、日期。然后進行凍存。