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小鼠腎上腺素能a1A受體ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠腎上腺素能a1A受體水平。用純化的小鼠腎上腺素能a1A受體抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腎上腺素能a1A受體，再與HRP標(biāo)記的腎上腺素能a1A受體抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎上腺素能a1A受體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準曲線計算樣品中小鼠腎上腺素能a1A受體濃度。
小鼠腎上腺素能a1A受體ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒操作步驟： 1. 標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 80 pmol/L 5號標(biāo)準品 150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 40 pmol/L 4號標(biāo)準品 150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 20 pmol/L 3號標(biāo)準品 150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 10 pmol/L 2號標(biāo)準品 150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 5 pmol/L 1號標(biāo)準品 150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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