大腸菌群顯色培養(yǎng)基

時間：2012-2-20閱讀：2030

大腸菌群顯色培養(yǎng)基
Coliform Chromogenic Medium

用途：用于快速、準確檢測大腸菌群，培養(yǎng)24小時，大腸菌群顯藍綠色腸菌群顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸菌群的快速檢測。大腸菌群顯藍綠色，其它菌顯黃色或無色，革蘭氏陽性菌被抑制。

成份 (g/L)

特殊營養(yǎng)物質	47.55
顯色劑	0.35
瓊脂	13.0
pH 7.0-7.2 25 ℃

此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結果。

注意

此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。

用法

稱取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌，煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶， 116 ℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心，傾入冷卻至 45 -50 ℃ 培養(yǎng)基約15ml ，混勻，凝固后， 36 ± 1 ℃ 倒置培養(yǎng) 18 ～ 24h 。或冷卻至 45-50 ℃時，傾入無菌平皿，瓊脂*凝固后，在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時，加入適當稀釋度的樣品液 1ml ，涂布于培養(yǎng)基上， 36 ± 1 ℃培養(yǎng) 18 ～ 24h 。

貯存

制備好的平板應立即使用，應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處，保存溫度 2-8 ℃，注意避光保存。

失效

干燥培養(yǎng)基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

操作步驟

1 、按國家標準、 SN 標準、 FDA 標準或其它方法制備樣品液

2 、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50 ℃顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上

3 、 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ～ 24h ，選用有 30 ～ 200 個菌落的平板，計數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸菌群菌落。大腸菌群典型菌落為藍綠色，其它細菌為無色或黃色菌落。

總大腸菌群 = 藍綠色菌落

4 、對可疑大腸菌群菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上， 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 12-16 小時，挑取單菌落做大腸菌群 BGLB 發(fā)酵試驗。

質量控制

1 、外觀

此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養(yǎng)基。

2 、微生物試驗

在 36 ± 1 ℃ 培養(yǎng) 18 ～ 24h 小時：

質控菌株	ATCC	生長情況	菌落顏色
單增李氏菌	27853	-/+	無色
*	25923	-/+	無色
大腸桿菌	25922	+++	藍色
沙門氏菌	+++	無色
大腸菌群	+++	藍色

方法的局限性

本培養(yǎng)基鑒定大腸菌群，少數(shù)情況下可能會出現(xiàn)假陽性，但不會出現(xiàn)假陰性，有時可能需做其它補充試驗。

典型特征

大腸菌群典型菌落為藍綠色，其它細菌為無色或黃色菌落。

參考文獻

• FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of ?-glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. – J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).

• KILIAN, M. a. BüLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. – Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).

LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la ?–galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bactériologique, en particulier des Enterobacteriaceae. – Ann. Inst. Pasteur ( Paris ), 102; 267-277 (1962).

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