各國(guó)細(xì)胞庫(kù)支原體污染的統(tǒng)計(jì)表

國(guó)家　  受支原體污染(%)  報(bào)告年度

USA－FDA  15  1993(past 30 years)

USA－ATCC  15-20  1992

Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22  1981 1987-19931998

Germany－DSM  36  1990-1994

Argentina  65  1987

Israel  32  1986-1993

China  95   1990

造成支原體高污染率的原因?yàn)?/strong>：

1.支原體size 0.1~0.8 um，無細(xì)胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um）

2.支原體污染時(shí)，沒有明顯的肉眼或一般光學(xué)顯微鏡可觀察到的特征變化

3.過去缺乏簡(jiǎn)單、快速且可靠的檢測(cè)方式

4.細(xì)胞流通間缺乏品管，造成實(shí)驗(yàn)室間的相互污染

5.研究或操作人員忽略污染問題

支原體污染了來源: 

1.  已受污染的細(xì)胞

2.  操作人員的疏失

3.  已受污染的培養(yǎng)基、血清

4.  操作環(huán)境不良、實(shí)驗(yàn)器具不潔等

由于支原體為人體口腔中之正常菌叢，實(shí)驗(yàn)室之操作人員的污染亦可能為污染源，須十分注意。而萬一細(xì)胞已受支原體污染時(shí)，*的處理原則為將細(xì)胞高壓滅菌后丟棄，以免污染其它潔凈的細(xì)胞株。但是若是堅(jiān)持要作去除支原體污染，有以下幾種方法，只不過結(jié)果會(huì)與原始的細(xì)胞特性有差異。

去除支原體污染：

1. 抗生素處理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（Bayer），Enrofloxacin（Bayer）

2. Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine

3. Anti-sera

預(yù)防與控制方面可從以下各點(diǎn)加強(qiáng)注意：

 設(shè)備方面：

1.  使用已作支原體測(cè)試ok之細(xì)胞株

2.  于另一隔離之區(qū)域操作未知是否有支原體污染之細(xì)胞

3.  使用不添加抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞

 檢測(cè)方面：定期以標(biāo)準(zhǔn)的支原體檢測(cè)方法檢測(cè)細(xì)胞、培養(yǎng)基、血清、ddH2O有否被支原體污染。

 實(shí)驗(yàn)操作人員之無菌觀念與無菌操作技術(shù)之要求