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用1 mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1.0 mL，沿管壁緩慢注于裝有9 mL0.85％生理鹽水的無菌試管中（注意吸管不要觸及稀釋液），振搖試管或換用1支無菌吸管反復吹打使其混合均勻，制成1:100的樣品勻液。
另取1 mL無菌吸管或微量移液器吸頭，按上述操作順序，做10倍遞增樣品勻液，如此每遞增稀釋一次，即換用1次1 mL滅菌吸管或吸頭。
根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或?qū)z樣污染情況的估計，選擇三個連續(xù)的適宜稀釋度，每個稀釋度吸取0.1 mL稀釋液于MRS瓊脂平板或MC瓊脂平板進行表面涂布，每個稀釋度作兩個平皿。MC瓊脂平板用于嗜熱鏈球菌的計數(shù)。含雙歧桿菌的樣品需厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48 h±2 h,不含雙歧桿菌的樣品需兼性厭氧，置36 ℃±1 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48 h±2 h,培養(yǎng)后選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù)。乳酸菌在MRS和MC培養(yǎng)基上菌落生長形態(tài)特征。
| MRS瓊脂 | MC瓊脂 |
乳桿菌屬 (Lactobacillus) | 平皿底為黃色，菌落中等大小，凸起，微白色，濕潤，邊緣整齊，菌落呈圓形，直徑為3.0 mm±1 mm。 | 平皿底為粉紅色，菌落較小，白色或淡粉色，邊緣不太整齊，直徑2.0 mm±1 mm,可有淡淡的暈。 |
雙歧桿菌屬 (Bifidobacterium) | 兼性需氧培養(yǎng)條件下不生長。在厭氧培養(yǎng)條件下，平皿底為黃色，菌落中等大小，瓷白色，邊緣整齊光滑，菌落呈圓形，直徑為2.0 mm±1 mm。 | 兼性需氧培養(yǎng)條件下不生長。在厭氧培養(yǎng)條件下，平皿底為粉紅色，菌落較小，白色，邊緣整齊，直徑1.5 mm±1 mm,可有淡淡的暈。 |
嗜熱鏈球菌 (Streptococcus thermophilus) | 平皿底為黃色，菌落偏小，白色，濕潤，邊緣整齊，菌落呈圓形，直徑為1.0 mm±1 mm。 | 平皿底為粉紅色，菌落中等偏小,邊緣整齊光滑的紅色菌落，直徑2.0 mm±1 mm,可有淡淡的暈。 |
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