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上海永葉生物科技有限公司

培養(yǎng)基與培養(yǎng)時間對檢測水體中細菌總數(shù)的影響

時間:2015-7-21閱讀:129
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我們采用4種不同培養(yǎng)基對水體中細菌進行培養(yǎng),比較不同培養(yǎng)基與不同培養(yǎng)時間對水體中細菌總數(shù)檢測結(jié)果的影響,現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白胨葡萄糖瓊脂、857培養(yǎng)基。

1.2 樣品來源:1998年1O月隨機采取本市便河居民點生活用自來水,便河河水及本院池塘塘水各9份。 

1.3 方法:自來水采樣:先將采樣點自來水*開放,放水5分鐘后調(diào)水流量,常規(guī)無菌采集水樣500ml,并加入無菌的3%*溶液0.5ml以除去殘余氯;河水與塘水采樣:先將密封狀態(tài)的無菌采樣瓶*浸入水中后,掀開瓶塞,取樣約500ml。按照“GB4789.2—94微生物學(xué)部分"進行細菌總數(shù)檢測。每次以無菌方法分別吸取lml充分混勻的水樣于滅菌空平皿中,每份水樣各加8個,每2個為1組,隨即分別加入15ml滅菌并置45℃預(yù)溫的營養(yǎng)瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白胨葡萄糖瓊脂、857瓊脂并充分混勻,凝固后,置37~C培養(yǎng)24h、48h、72h、96h并分別記錄各培養(yǎng)基中菌落形成單位(CFU)均數(shù)。采用秩和檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 4種方法培養(yǎng)后CFU均數(shù)結(jié)果:24h內(nèi)4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)zui低,隨培養(yǎng)時間延長而增高


2.2 不同時間培養(yǎng)后4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)的結(jié)果顯示:培養(yǎng)48h與72h、72h與96h組間CFU均數(shù)差異無顯著性;培養(yǎng)24h與48h,24h與72h、24h與96h、48h與96h各組間、CFU均數(shù)的差異有高度顯著性(P<0.01)。

2.3 4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)間兩兩比較:除營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基之間CY'U均數(shù)的差異無顯著性外,肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、CFU均數(shù)的差異均有高度顯著性(P<0.01)。

3 討論

3.1 本組4種培養(yǎng)基接種標本后,l~4天內(nèi)CFU均數(shù)均隨培養(yǎng)時間延長而增加,培養(yǎng)24h與48h、72h、96h之間差異顯著(P<0.01);但培養(yǎng)48h與72h、72h與97h組問差異無顯著性。本結(jié)果顯示:雖然培養(yǎng)時間對CF’U數(shù)的變化有直接影響,但按“GB4789.2—94微生物部分"方法培養(yǎng)48h報告結(jié)果,能準確地檢測水體樣本的細菌總數(shù)。

3.2 按“GB4789.2-_94微生物部分"的方法,檢測細菌總數(shù)采用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。本實驗采用包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在內(nèi)的4種不同培養(yǎng)基進行檢測,結(jié)果表明,不同培養(yǎng)基之間CFU均數(shù)差異顯著,且肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基>營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基>蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基>857培養(yǎng)基。值得注意的是肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的CY'U均數(shù)差異顯著,且培養(yǎng)至24h觀察結(jié)果時,肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基表面的菌落較大,易辨認,而營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上菌落較小,需培養(yǎng)48h后計數(shù)。這可能與前者用新鮮牛肉浸液配制,而后者用牛肉膏配制有關(guān)。因肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)高于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,更有利于水體樣本中細菌總數(shù)的檢測。

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