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上海永葉生物科技有限公司

流感病毒檢測方法

時間:2016-4-12閱讀:314
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流感病毒在病毒分類學上屬于正黏病毒科,其遺傳物質(zhì)由8個大小不等的獨立單股負鏈RNA片段組成,共編碼10個蛋白。其特點是容易發(fā)生變異。分為甲乙丙三型,其中甲型流感病毒經(jīng)常發(fā)生抗原變異,可感染人和多種動物,常引起大流行和中小流行。乙型流感病毒變異較少,可感染人類,引起爆發(fā)或小流行。丙型較穩(wěn)定,可感染人類,多為散發(fā)病例。目前流感病毒在世界時有暴發(fā)流行,因此建立科學快速的診斷方法顯得尤其重要!

 


圖1:透射電鏡下的流感病毒(175000X)

 

   目前流感病毒的常用檢測方法檢測方法主要有病毒分離鑒定、血清學方法和分子生物學方法。

 

病毒的分離鑒定

 

   病毒分離是流感病毒檢測的傳統(tǒng)方法之一,包括雞胚接種和細胞培養(yǎng)。目前分離流感病毒主要應(yīng)用馬達犬腎細胞(MDCK)為宿主系統(tǒng)。流感病毒的檢測時間一般需要4-5天。

 

免疫學檢測方法

 

血清學診斷

 

   主要是檢測患者血清中的抗體水平,即用已知的流感病毒抗原來檢測血清中的抗體。血清抗體檢測方法不能在感染初期抗體還未產(chǎn)生或低于檢測濃度時進行檢測。

 

抗原檢測

 

   病毒抗原的檢測的方法主要有兩類:直接熒光抗體檢測和免疫膠體金層析方法。直接熒光抗體檢測方法是應(yīng)用熒光色素標記抗體分子后,再與標本中特異性抗原結(jié)合,用熒光顯微鏡觀察細胞中的病毒抗原及其存在的位置。免疫膠體金層析技術(shù)具有操作簡便,無需任何儀器;檢測結(jié)果直觀,方便基層單位和現(xiàn)場使用。

 

病毒核酸檢測

 

 

 

   常用的方法有核酸雜交、逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)、多重逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)、酶聯(lián)免疫PCR、實時定量。PCR、依賴性核酸序列擴增、熒光PCR等方法。近年來,應(yīng)用基因芯片對流感病毒進行檢測和分型是研究的一大熱點,可以同時檢測多種病毒,尤其適用于流感多亞型、易變異的特點。但這種方法對實驗條件要求較高,核酸檢測的普遍優(yōu)點在于具有檢測速度快、特異性強、易于操作的特點。

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