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公司動(dòng)態(tài)

關(guān)于Western Blot中的抗體常見問題

閱讀：253發(fā)布時(shí)間：2017-12-28

不同抗體，即使是同一公司的抗體，其佳的抗體稀釋度也是不一樣的，需要在實(shí)驗(yàn)中摸索。轉(zhuǎn)膜過夜沒有必要，轉(zhuǎn)膜的目是將蛋白轉(zhuǎn)到膜上，不必浪費(fèi)時(shí)間。具體的轉(zhuǎn)膜時(shí)間，要根據(jù)目的蛋白分子量的大??；轉(zhuǎn)膜的設(shè)備，是半干式，還是濕式。一抗可以過夜，如果想所短Western Blot時(shí)間的話，可以增高一抗的孵育溫度，一般37度，兩小時(shí)；也可以參照抗體說明書。一抗和二抗得稀釋度，一抗1：1500；二抗1：20000。洗膜時(shí)，可以多洗幾次，是在封閉；一抗和二抗后至少是5x5min。


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