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上海宸功生物技術有限公司
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明膠法大鼠胚胎干細胞繁殖試劑盒產品說明書

時間:2017/4/1閱讀:1663
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明膠法大鼠胚胎干細胞繁殖試劑盒產品說明書
主要用途
明膠法大鼠胚胎干細胞繁殖試劑是一種旨在通過特殊明膠替代滋養(yǎng)細胞作為培養(yǎng)表面的包被處理,提供細
胞的附著生長,促進細胞繁殖,同時體外維護大鼠胚胎干細胞的多能性,抑制培養(yǎng)中的胚胎干細胞的自發(fā)
分化的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于新的大鼠胚胎干細胞系
的建立、培養(yǎng)已有的胚胎干細胞系以及無基質細胞的CD34 干細胞等。產品即到即用,嚴格無菌、無病毒
和支原體,性能穩(wěn)定,促細胞生長效應,重復性高,建立標準化體系。
技術背景
胚胎干細胞生長在基質表面,穩(wěn)定繁殖效應明顯。同時,在富含各種營養(yǎng)元素的培養(yǎng)基中,包括精制胎牛
血清,白血病抑制因子,非必需氨基酸、巰基乙醇以及預防污染的青霉素和鏈霉素等,維持胚胎干細胞活
性。產品符合美國USDA、FDA 和USP 的規(guī)定。
產品內容
包被液(Reagent A) 30 毫升
營養(yǎng)液(Reagent B) 100 毫升
產品說明書1 份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保證6 月
用戶自備
25cm2 細胞培養(yǎng)瓶:用于干細胞培養(yǎng)的容器
微波爐:用于試劑加熱
細胞培養(yǎng)箱:用于細胞孵育培養(yǎng)的設備
實驗提示
1. 準備1 個25cm2 細胞培養(yǎng)瓶
2. 取出包被液(Reagent A),擰松瓶蓋(不要打開)
3. 放進微波爐加熱(注意:避免溢出)
4. 移取2 毫升包被液(Reagent A)到25cm2 細胞培養(yǎng)瓶,均勻鋪平
5. 室溫下,靜置30 分鐘
6. 使用無菌吸管,真空抽吸培養(yǎng)瓶里的包被液(Reagent A)
7. 加入1 毫升(5X 105 細胞)用戶自備的大鼠胚胎干細胞
8. 加入4 毫升營養(yǎng)液(Reagent B),混勻鋪平
9. 放進37℃二氧化碳細胞培養(yǎng)箱孵育24 小時
10.小心抽去細胞培養(yǎng)液
11.重復實驗步驟8 至10 一次
12.傳代前4小時使用2毫升營養(yǎng)液(Reagent B)換液一次,傳代比例為1:1至1:10之間
注意事項
1. 本產品為10 次操作
2. 嚴格無菌操作
3. 操作時須戴手套
4. 使用時,避免污染母液
5. 用戶根據需求,可以添加各種生長因子,例如成纖維細胞生長因子(Fibroblast growth factor;FGF)等
6. 建議每天換液;如果溶液顏色為桔紅色,務必即刻換液,不要等到溶液顏色為黃色
7. 建議按下表用量使用
培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶包被液(Reagent A) 營養(yǎng)液(Reagent B)
6 孔板1.5 毫升3 毫升
30mm 1.5 毫升2 毫升
60mm 3 毫升6 毫升
100mm 6 毫升12 毫升
25cm2 2 毫升4 毫升
75cm2 6 毫升15 毫升
8. 本公司提供系列細胞培養(yǎng)產品
質量標準
1. 產品經鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產品經鑒定無噬菌體、支原體、病毒污染

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