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主要用途
細(xì)胞組織蛋白酶B活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)二肽化合物底物Ac-FR-pNA,在組織蛋白酶L抑制劑的存在下,受到組織蛋白酶B的水解,釋放出黃色對(duì)硝基苯胺,即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等)組織蛋白酶B的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。
保存方式
保存清理液(Reagent A)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;底物液(Reagent E)避免光照和反復(fù)凍融;有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器
15毫升錐形離心管:用于樣品操作的容器
細(xì)胞刮脫棒:用于貼壁細(xì)胞脫離處理
微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品沉淀
培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)物孵育
96孔板或100微升1厘米光徑比色皿:用于樣品比色測(cè)定的容器
酶標(biāo)儀或分光光度儀:用于樣品比色分析
注意事項(xiàng)
1.本產(chǎn)品為21次(酶標(biāo)板)操作,包括背景對(duì)照
2.操作時(shí),須戴手套
3.系統(tǒng)操作過(guò)程中,背景測(cè)定只需1次
4.樣品須澄清,且避免反復(fù)凍融
5.建議待測(cè)樣本蛋白濃度為50微克/5微升;如果樣本酶活性過(guò)低,即90分鐘讀數(shù)過(guò)低,則可以延長(zhǎng)反應(yīng)孵育時(shí)間至16小時(shí);其次增加樣本量(本公司提供 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)
6.如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低,可以調(diào)整樣品濃度
7.可以使用組織蛋白酶B抑制劑CA-074作為抑制劑對(duì)照或陰性對(duì)照
8.組織蛋白酶B單位活性定義為:在37℃,pH 5.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠切離1微摩爾二肽化合物底物Ac-FR-pNA所需的酶量作為一個(gè)活性單位
9.本公司提供系列組織蛋白酶學(xué)檢測(cè)試劑產(chǎn)品
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