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當(dāng)前位置:上海宸功生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書
主要用途
植物組織葉綠體DNA萃取試劑是一種旨在通過物理破壁和化學(xué)破膜及離心處理方法,從植物組織中分離出完整而純化的葉綠體細胞器,然后進一步生物酶處理以獲得高質(zhì)量的葉綠體DNA的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于菠菜、豌豆、萵苣、卷心菜、甜菜、煙草等各種新鮮植物組織,包括葉片(leaf)、谷粒(grain)、種子(seed)等葉綠體核酸成分的分離。用于高等植物不育性、葉綠體遺傳等研究。適合于后續(xù)的雜交、克隆、酶切、PCR分析等。產(chǎn)品即到即用,操作簡易,性能穩(wěn)定,無核酶污染,萃取純度和產(chǎn)量皆高。
技術(shù)背景
葉綠體(chloroplast)是綠色植物進行光合作用和能量轉(zhuǎn)化的重要細胞器。葉綠體是細胞質(zhì)中的一種色素體,因含葉綠素而成綠色。葉綠體由外被(envelope)、類囊體(thylakoid)和基質(zhì)(stroma)組成。葉綠體DNA是一種閉合環(huán)狀雙股結(jié)構(gòu),含有10至30個基因,編碼200個蛋白質(zhì)。
用戶自備
15毫升錐形離心管:用于葉綠體初步制備物存放的容器
50毫升錐形離心管:用于植物組織收集、離心和清洗的容器
1.5毫升離心管:用于保存葉綠體
尼龍絲或60微米尼龍網(wǎng):用于去除植物裂解殘渣
小型漏斗:用于過濾的裝置
4℃臺式離心機:用于沉淀細胞和分離細胞器成分
微型臺式離心機:用于沉淀核酸
DOUNCE勻漿器:用于裂解細胞
58℃恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物
渦旋震蕩儀:用于混勻
注意事項
1.本產(chǎn)品為10次操作(1克植物組織)
2.建議使用新鮮植物樣品,暗室4℃冰箱里過夜
3.植物樣品務(wù)必避光,以防止淀粉聚集
4.葉綠體操作均須在4℃或以下狀態(tài)下進行
5.操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)和保存液(Reagent E)
6.建議使用足夠的組織量
7.建議植物組織使用物理法組織勻漿器操作為;德國的BRAUN細胞勻漿器zui為理想
8.建議嚴格控制操作時間
9.通常勻化次數(shù)為80下(或組織塊狀消失為止)達到80%的組織細胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的組織細胞裂解程度:完整組織細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)
10.通常孵育5分鐘達到80%的組織細胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的組織細胞裂解程度:完整組織細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)
11.試劑中的溶液使用前搖勻;酶解液(Reagent G)需放進37℃溫育少許;為避免反復(fù)凍融,建議適量分裝
12.通常1克植物組織中提取的葉綠體DNA達1至10微克
13.如果需要獲得99%以上純度的葉綠體DNA,建議使用高多糖/酚植物組織葉綠體DNA高純分離試劑盒-16011.3.2
14.本公司提供系列植物葉綠體分析技術(shù)產(chǎn)品
質(zhì)量標準
1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無核酶污染
3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定萃取產(chǎn)量和純化程度高
4.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無基因組DNA污染
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